Gå til innholdet
COS-7
Vev
Nyre
Synonymer
Cos-7, COS7, Cos7, CV-1 in Origin Simian-7

Dokumenter

COS-7

Cell line · Produktnummer 605470

COS-7 cells are a fibroblast-like cell line derived from African green monkey kidney tissue and are a vital resource in research, particularly for their h...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

COS-7-celler er en fibroblastlignende cellelinje som stammer fra nyrevev fra afrikanske grønne aper, og de er en viktig ressurs i forskning, særlig på grunn av sin høye transfeksjonseffektivitet, noe som gjør dem til et populært valg for uttrykk av rekombinante proteiner. COS-7-celler er avledet fra CV-1-cellelinjen og transformert med en mutantform av simian virus 40 (SV40), som inkluderer et replikasjonsopprinnelse som muliggjør episomal replikasjon av transfekterte plasmider som inneholder SV40-replikasjonsopprinnelsen.

Transfeksjon av COS-7-celler gjøres lettere ved hjelp av transfeksjonsreagenser som Lipofectamine, med en effektivitet som gjenspeiler den som er observert i HeLa-celler. Konvensjonelle metoder kan oppnå opptil 80 % transfeksjonseffektivitet i COS-7-celler, noe som viser hvor enkle de er å manipulere genetisk. COS-7-cellenes evne til å ta imot store plasmider og replikere dem, noe som fører til høye utbytter av de ønskede rekombinante proteinene, gjør dem til en uvurderlig ressurs for ulike anvendelser, blant annet genekspresjonsstudier, undersøkelser av signaltransduksjonsveier og produksjon av proteiner for biokjemiske analyser.

COS-7-celler er svært mottakelige for ulike virus, noe som gjør dem til en utmerket modell for virologiske studier, blant annet undersøkelser av virus-vert-interaksjoner, utredning av virale livssykluser og testing av antivirale legemidler. Cellenes toleranse for virusinntrengning og -replikasjon utnyttes til å studere mekanismene bak virusinfeksjon, patogenese og de cellulære responsene som utløses av virale inntrengere. COS-7-celler er derfor et verdifullt verktøy i utviklingen av virusvektorer for genterapi og vaksineforskning.

COS-7-celler er en hjørnestein i forskningen på grunn av deres høye transfeksjonseffektivitet og anvendelighet i rekombinant proteinuttrykk. Den enkle genetiske manipulerbarheten, kombinert med mottakeligheten for virus, gjør dem uunnværlige for studier av genuttrykk, signaltransduksjon, virologi og utvikling av virusvektorer, noe som befester deres rolle som et allsidig verktøy innen både grunnleggende og anvendt biologisk forskning.

Vev
Nyre
Søknader
Vert for transfeksjon. Egnet for transfeksjon med vektorer som krever uttrykk av SV40 T-antigen.
Synonymer
  • Cos-7
  • COS7
  • Cos7
  • CV-1 in Origin Simian-7

02Klassifisering

Organisme
Afrikansk grønnape
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This African green monkey kidney-derived cell line (COS-7) contains the replication-deficient SV40 mutant pSV6-2 introduced by transfection, supporting immortalization. The construct is integrated into CV-2-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastlignende
Celletype
Fibroblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
COS-7 (Cytion-katalognummer 605470)
NCBI-skattenummer
9534
Cellosaurus
CVCL_0224

05Uttrykk og mottakelighet

Virusfølsomhet
SV40 (lytisk vekst), SV40 tsA209 ved 40 grader Celsius, SV40-mutanter med delesjoner i den tidlige regionen
Produkter
T-antigen

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2 vil gi et sammenvokst lag på omtrent 4 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Voksen