Pāriet uz saturu
COS-7
Audums
Nieres
Sinonīmi
Cos-7, COS7, Cos7, CV-1 in Origin Simian-7

Dokumenti

COS-7

Cell line · Preces numurs 605470

COS-7 cells are a fibroblast-like cell line derived from African green monkey kidney tissue and are a vital resource in research, particularly for their h...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

COS-7 šūnas ir fibroblastiem līdzīga šūnu līnija, kas iegūta no Āfrikas zaļo pērtiķu nieru audiem, un tās ir svarīgs resurss pētniecībā, jo īpaši to augstās transfekcijas efektivitātes dēļ, kas padara tās par populāru izvēli rekombinantu proteīnu ekspresijai. COS-7 šūnas ir atvasinātas no CV-1 šūnu līnijas un transformētas ar 40. zīdītājvīrusa (SV40) mutantu formu, kas ietver replikācijas sākumu, kas ļauj epizomāli replicēt transficētās plazmīdas, kuras satur SV40 replikācijas sākumu.

COS-7 šūnu transfekciju atvieglo transfekcijas reaģenti, piemēram, Lipofectamine, ar efektivitāti, kas atbilst HeLa šūnām novērotajai. Ar parastajām metodēm COS-7 šūnās var sasniegt līdz pat 80 % transfekcijas efektivitāti, kas liecina par to, ka tās ir viegli ģenētiski manipulējamas. COS-7 šūnu spēja uzņemt lielas plazmīdas un replicēt tās, nodrošinot augstu vēlamo rekombinēto proteīnu iznākumu, padara tās par nenovērtējamu resursu dažādiem lietojumiem, tostarp gēnu ekspresijas pētījumiem, signālu pārneses ceļu izpētei un proteīnu ražošanai bioķīmiskām analīzēm.

COS-7 šūnas ir ļoti uzņēmīgas pret dažādiem vīrusiem, tāpēc tās ir lielisks modelis virusoloģijas pētījumiem, tostarp vīrusa un saimnieka mijiedarbības pētījumiem, vīrusu dzīves cikla noskaidrošanai un pretvīrusu zāļu testēšanai. Tās ir vispiemērotākās vīrusu iekļūšanai un replikācijai, lai pētītu vīrusu infekcijas mehānismus, patoģenēzi un šūnu atbildes reakcijas, ko izraisa vīrusu iebrucēji. Līdz ar to COS-7 šūnas kalpo kā vērtīgs instruments vīrusu vektoru izstrādē gēnu terapijas un vakcīnu pētījumiem.

COS-7 šūnas ir stūrakmens pētniecībā, jo tām ir augsta transfekcijas efektivitāte un lietderība rekombinantu proteīnu ekspresijā. To vieglais ģenētisko manipulāciju vieglums apvienojumā ar uzņēmību pret vīrusiem padara tās neaizstājamas gēnu ekspresijas, signālu pārneses, virusoloģijas un vīrusu vektoru izstrādes pētījumos, nostiprinot to kā daudzpusīga instrumenta lomu gan fundamentālajās, gan lietišķajās bioloģijas zinātnēs.

Audums
Nieres
Pieteikumi
Transfekcijas saimnieks. Piemērots transfekcijai ar vektoriem, kam nepieciešama SV40 T antigēna ekspresija.
Sinonīmi
  • Cos-7
  • COS7
  • Cos7
  • CV-1 in Origin Simian-7

02Klasifikācija

Organisms
Āfrikas zaļā pērtiķis
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This African green monkey kidney-derived cell line (COS-7) contains the replication-deficient SV40 mutant pSV6-2 introduced by transfection, supporting immortalization. The construct is integrated into CV-2-derived cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Fibroblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Fibroblasti

04Identifikatori

Atsauce
COS-7 (Cytion kataloga numurs 605470)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9534
Cellosaurus
CVCL_0224

05Pazīmes un uzņēmība

Jutība pret vīrusiem
SV40 (lītiska augšana), SV40 tsA209 40 °C temperatūrā, SV40 mutanti ar agrīnā reģiona delecijām
Produkti
T antigēns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2 veidos konfluentu slāni apmēram 4 dienu laikā.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
Pieaugušo