HT-1197

HT-1197 est une lignée cellulaire de carcinome urothélial humain établie à partir d'un carcinome à cellules transitionnelles de haut grade de la vessie chez un patient adulte de sexe masculin. Cette lignée provient d'une tumeur récurrente après de multiples résections chirurgicales et a montré un comportement clinique agressif avec des métastases étendues avant le décès du patient. Morphologiquement, les cellules HT-1197 présentent des caractéristiques épithéliales, notamment la présence de microvillosités, de tonofibrilles et de desmosomes observés au microscope électronique, ce qui indique leur origine épithéliale urothéliale. Ces cellules sont distinctes sur le plan caryotypique, avec des chromosomes marqueurs identifiables, et démontrent la capacité de croître dans une gélose molle, une caractéristique de la croissance indépendante de l'ancrage, et sont tumorigènes à la fois chez la souris nude et chez le hamster immunodéprimé.

Au niveau moléculaire, HT-1197 porte plusieurs mutations oncogéniques clés communément associées au cancer de la vessie. Il porte une mutation activatrice S249C dans le FGFR3 et une mutation E545K dans le PIK3CA, qui sont toutes deux répandues dans la pathogenèse du carcinome urothélial de la vessie. En outre, le HT-1197 présente une mutation Q61R dans le NRAS et des mutations dans la région du promoteur de TERT, ce qui suggère une capacité proliférative et une activité télomérase accrues. Le statut TP53 comprend une altération c.1094A>G, ce qui implique une perturbation du contrôle du cycle cellulaire et de la stabilité génomique. Le profilage génomique indique que HT-1197 appartient à un sous-ensemble de lignées cellulaires de cancer urothélial marquées par une forte instabilité génomique et des caractéristiques moléculaires compatibles avec le sous-type de cancer de la vessie le plus agressif et le plus invasif sur le plan musculaire.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie