HT-1197

HT-1197 to ludzka linia komórkowa raka urotelialnego utworzona z raka przejściowokomórkowego pęcherza moczowego o wysokim stopniu złośliwości u dorosłego mężczyzny. Linia ta pochodziła z nawracającego guza po wielokrotnych resekcjach chirurgicznych i wykazywała agresywne zachowanie kliniczne z rozległymi przerzutami przed śmiercią pacjenta. Morfologicznie, komórki HT-1197 wykazują cechy nabłonkowe, w tym obecność mikrokosmków, tonofibryli i desmosomów obserwowanych pod mikroskopem elektronowym, co wskazuje na ich pochodzenie z nabłonka urotelialnego. Komórki te są kariotypowo odrębne z możliwymi do zidentyfikowania chromosomami markerowymi i wykazują zdolność do wzrostu w miękkim agarze, co jest cechą charakterystyczną wzrostu niezależnego od zakotwiczenia, i są nowotworowe zarówno u nagich myszy, jak i chomików poddanych immunosupresji.

Na poziomie molekularnym HT-1197 zawiera kilka kluczowych mutacji onkogennych powszechnie związanych z rakiem pęcherza moczowego. Posiada aktywującą mutację S249C w FGFR3 i mutację E545K w PIK3CA, z których obie są powszechne w patogenezie raka urotelialnego pęcherza moczowego. Ponadto HT-1197 ma mutację Q61R w NRAS i mutacje w regionie promotora TERT, co sugeruje zwiększoną zdolność proliferacyjną i aktywność telomerazy. Status TP53 obejmuje zmianę c.1094A>G, co dodatkowo sugeruje zakłócenie kontroli cyklu komórkowego i stabilności genomu. Profilowanie genomowe wskazuje, że HT-1197 należy do podzbioru linii komórkowych raka urotelialnego charakteryzujących się wysoką niestabilnością genomową i cechami molekularnymi zgodnymi z bardziej agresywnym, inwazyjnym podtypem raka pęcherza moczowego.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym