HT-1197

HT-1197 è una linea cellulare di carcinoma uroteliale umano derivata da un carcinoma a cellule transizionali di alto grado della vescica in un paziente maschio adulto. Questa linea è stata derivata da un tumore ricorrente dopo molteplici resezioni chirurgiche e ha mostrato un comportamento clinico aggressivo con metastasi diffuse prima della morte del paziente. Morfologicamente, le cellule HT-1197 presentano caratteristiche epiteliali, tra cui la presenza di microvilli, tonofibrille e desmosomi, come osservato al microscopio elettronico, indicando la loro origine epiteliale uroteliale. Queste cellule sono cariotipicamente distinte con cromosomi marcatori identificabili e dimostrano la capacità di crescere in agar morbido, un segno distintivo di crescita indipendente dall'ancoraggio, e sono tumorigeniche sia in topi nudi che in criceti immunosoppressi.

A livello molecolare, HT-1197 presenta diverse mutazioni oncogeniche chiave comunemente associate al cancro della vescica. Presenta una mutazione attivante S249C in FGFR3 e una mutazione E545K in PIK3CA, entrambe prevalenti nella patogenesi del carcinoma uroteliale della vescica. Inoltre, HT-1197 presenta una mutazione Q61R in NRAS e mutazioni nella regione del promotore TERT, che suggeriscono una maggiore capacità proliferativa e attività della telomerasi. Lo stato di TP53 include un'alterazione c.1094A>G, che implica un'ulteriore alterazione del controllo del ciclo cellulare e della stabilità genomica. Il profilo genomico indica che HT-1197 appartiene a un sottogruppo di linee cellulari di cancro uroteliale caratterizzate da un'elevata instabilità genomica e da caratteristiche molecolari coerenti con il sottotipo più aggressivo e muscolo-invasivo del cancro della vescica.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia