HT-1197

HT-1197 on inimese uroteliaalse kartsinoomi rakuliin, mis on loodud täiskasvanud meessoost patsiendi kõrgekvaliteedilisest üleminekurakukartsinoomist põies. See liin on saadud pärast mitmekordset kirurgilist resektsiooni retsidiveerunud kasvajast, millel oli enne patsiendi surma agressiivne kliiniline käitumine ja laialt levinud metastaasid. Morfoloogiliselt on HT-1197 rakkudel epiteeli tunnused, sealhulgas mikrovillide, toonofibrillide ja desmosoomide olemasolu, nagu on täheldatud elektronmikroskoopias, mis viitab nende uroteeli epiteeli päritolule. Need rakud on karyotüübiliselt eristatavad, nende kromosoomid on identifitseeritavad ja neil on võime kasvada pehmel agaril, mis on ankurdumisest sõltumatu kasvu tunnuseks, ning nad on tuumorigeensed nii alasti hiirtel kui ka immunosupresseeritud hamstritel.

Molekulaarsel tasandil on HT-1197-l mitu peamist onkogeenset mutatsiooni, mida tavaliselt seostatakse põievähiga. Ta kannab aktiveerivat S249C mutatsiooni FGFR3-s ja E545K mutatsiooni PIK3CA-s, mis mõlemad on levinud uroteliaalse põiekartsinoomi patogeneesis. Lisaks sellele on HT-1197-l NRAS-is Q61R-mutatsioon ja mutatsioonid TERT-promootori piirkonnas, mis viitab suurenenud proliferatiivsele võimekusele ja telomeraasi aktiivsusele. TP53 staatus sisaldab c.1094A>G muutust, mis viitab täiendavalt rakutsükli kontrolli ja genoomi stabiilsuse häiretele. Genoomiline profiilianalüüs näitab, et HT-1197 kuulub uroteeli vähi rakuliinide alamrühma, mida iseloomustab suur genoomiline ebastabiilsus ja molekulaarsed tunnused, mis on kooskõlas põievähi agressiivsema, lihasinvasiivse alatüübiga.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest