HT-1197

HT-1197 é uma linha celular de carcinoma urotelial humano estabelecida a partir de um carcinoma de células de transição de alto grau da bexiga num doente adulto do sexo masculino. Esta linha foi derivada de um tumor recorrente após múltiplas ressecções cirúrgicas e apresentou um comportamento clínico agressivo com metástases generalizadas antes da morte do doente. Morfologicamente, as células HT-1197 exibem caraterísticas epiteliais, incluindo a presença de microvilosidades, tonofibrilas e desmossomas, conforme observado em microscopia eletrónica, indicando a sua origem epitelial urotelial. Estas células são cariotipicamente distintas com cromossomas marcadores identificáveis e demonstram a capacidade de crescer em ágar macio, uma caraterística do crescimento independente de ancoragem, e são tumorigénicas tanto em ratinhos nus como em hamsters imunossuprimidos.

A nível molecular, o HT-1197 contém várias mutações oncogénicas chave normalmente associadas ao cancro da bexiga. É portador de uma mutação S249C activadora no FGFR3 e de uma mutação E545K no PIK3CA, ambas prevalecentes na patogénese do carcinoma urotelial da bexiga. Além disso, o HT-1197 tem uma mutação Q61R no NRAS e mutações na região promotora do TERT, o que sugere uma maior capacidade proliferativa e atividade da telomerase. O estado do TP53 inclui uma alteração c.1094A>G, o que implica uma perturbação do controlo do ciclo celular e da estabilidade genómica. O perfil genómico indica que a HT-1197 pertence a um subconjunto de linhas celulares de cancro urotelial marcadas por uma elevada instabilidade genómica e caraterísticas moleculares consistentes com o subtipo mais agressivo e músculo-invasivo do cancro da bexiga.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia