HT-1197

HT-1197 ir cilvēka urīnpūšļa uroteliālās karcinomas šūnu līnija, kas iegūta no pieaugušam vīrietim konstatētas augstas pakāpes urīnpūšļa pārejas šūnu karcinomas. Šī līnija tika iegūta no atkārtota audzēja pēc vairākkārtējas ķirurģiskas rezekcijas, un pirms pacienta nāves tai bija agresīva klīniskā uzvedība ar plašām metastāzēm. Morfoloģiski HT-1197 šūnām piemīt epitēlija iezīmes, tostarp mikroviļi, tonofibrilles un desmosomas, kas novērotas elektronu mikroskopijā, norādot uz to urotēlisko epitēlija izcelsmi. Šīm šūnām ir atšķirīgs kariotips ar identificējamām marķieru hromosomām, un tām piemīt spēja augt mīkstā agārā, kas ir no enkura neatkarīgas augšanas pazīme, un tās ir tumorigēnas gan kailām pelēm, gan imunosupresētiem kāmjiem.

Molekulārā līmenī HT-1197 satur vairākas galvenās onkogēnās mutācijas, kas parasti saistītas ar urīnpūšļa vēzi. Tajā ir aktivējošā S249C mutācija FGFR3 un E545K mutācija PIK3CA, kas abas ir izplatītas urīnpūšļa urīnpūšļa karcinomas patoģenēzē. Turklāt HT-1197 ir arī Q61R mutācija NRAS un mutācijas TERT promotora apgabalā, kas liecina par palielinātu proliferatīvo spēju un telomerāzes aktivitāti. TP53 statuss ietver c.1094A>G izmaiņas, kas vēl vairāk norāda uz šūnu cikla kontroles un genoma stabilitātes traucējumiem. Genomiskā profilēšana liecina, ka HT-1197 pieder urīnpūšļa vēža šūnu līniju apakšgrupai, kam raksturīga augsta genoma nestabilitāte un molekulārās īpašības, kas atbilst agresīvākam, muskuļus invazīvam urīnpūšļa vēža apakštipam.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu