HT-1197

HT-1197 on ihmisen uroteelikarsinooman solulinja, joka on peräisin aikuisen miespotilaan korkea-asteisesta virtsarakon siirtymäsolusyövästä. Tämä linja oli peräisin useiden kirurgisten resektioiden jälkeen uusiutuneesta kasvaimesta, joka käyttäytyi aggressiivisesti ja sai laajalle levinneitä etäpesäkkeitä ennen potilaan kuolemaa. Morfologisesti HT-1197-soluilla on epiteelipiirteitä, kuten mikrovilloja, tonofibrillejä ja desmosomeja elektronimikroskopiassa havaittuna, mikä viittaa niiden uroteeliperäiseen epiteeliperäisyyteen. Nämä solut ovat karyotyyppisesti erillisiä, ja niillä on tunnistettavat merkkikromosomit, ja ne osoittavat kykyä kasvaa pehmeässä agarissa, mikä on ankkuroitumisesta riippumattoman kasvun tunnusmerkki, ja ne ovat kasvainvaarallisia sekä alastomilla hiirillä että immunosuppressoituneilla hamstereilla.

Molekyylitasolla HT-1197:ssä on useita keskeisiä onkogeenisiä mutaatioita, jotka liittyvät yleisesti virtsarakon syöpään. Siinä on aktivoiva S249C-mutaatio FGFR3:ssa ja E545K-mutaatio PIK3CA:ssa, jotka molemmat ovat yleisiä uroteeliperäisen virtsarakkosyövän patogeneesissä. Lisäksi HT-1197:llä on Q61R-mutaatio NRAS:ssa ja mutaatioita TERT-promoottorin alueella, mikä viittaa lisääntyneeseen proliferatiiviseen kapasiteettiin ja telomeraasiaktiivisuuteen. TP53-status sisältää c.1094A>G-muutoksen, mikä viittaa lisäksi solusyklin hallinnan ja genomistabiilisuuden häiriöihin. Genomiprofilointi osoittaa, että HT-1197 kuuluu uroteelisyöpäsolulinjojen alaryhmään, jolle on ominaista suuri genominen epävakaus ja molekulaariset piirteet, jotka sopivat virtsarakon syövän aggressiivisempaan, lihasinvaasiiviseen alatyyppiin.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa