HT-1197

HT-1197 je buněčná linie lidského uroteliálního karcinomu vytvořená z high-grade karcinomu z přechodných buněk močového měchýře u dospělého muže. Tato linie byla odvozena z recidivujícího nádoru po několika chirurgických resekcích a před smrtí pacienta vykazovala agresivní klinické chování s rozsáhlými metastázami. Morfologicky vykazují buňky HT-1197 epiteliální znaky, včetně přítomnosti mikrovilů, tonofibril a desmosomů, jak bylo pozorováno při elektronové mikroskopii, což ukazuje na jejich uroteliální epiteliální původ. Tyto buňky jsou karyotypicky odlišné s identifikovatelnými markerovými chromozomy a vykazují schopnost růstu v měkkém agaru, což je znakem růstu nezávislého na ukotvení, a jsou tumorigenní jak u nahých myší, tak u imunosuprimovaných křečků.

Na molekulární úrovni obsahuje HT-1197 několik klíčových onkogenních mutací, které jsou běžně spojovány s rakovinou močového měchýře. Je nositelem aktivační mutace S249C v FGFR3 a mutace E545K v PIK3CA, které se vyskytují v patogenezi uroteliálního karcinomu močového měchýře. Kromě toho má HT-1197 mutaci Q61R v NRAS a mutace v oblasti promotoru TERT, což naznačuje zvýšenou proliferační schopnost a aktivitu telomerázy. Stav TP53 zahrnuje změnu c.1094A>G, což dále naznačuje narušení kontroly buněčného cyklu a genomové stability. Genomické profilování naznačuje, že HT-1197 patří do podskupiny buněčných linií uroteliálního karcinomu, které se vyznačují vysokou genomickou nestabilitou a molekulárními rysy odpovídajícími agresivnějšímu, svalově invazivnímu podtypu karcinomu močového měchýře.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení