HT-1197

HT-1197は、成人男性患者の高悪性度膀胱移行細胞癌から樹立されたヒト尿路上皮癌細胞株である。この細胞株は、複数回の外科的切除後に再発した腫瘍に由来し、患者の死亡前に広範な転移を伴う攻撃的な臨床挙動を示した。形態学的に、HT-1197細胞は、電子顕微鏡下で観察された微絨毛、トノフィブリルおよびデスモソームの存在を含む上皮性の特徴を示し、尿路上皮上皮由来であることを示している。これらの細胞は、識別可能なマーカー染色体を持つ核型的に異なる細胞であり、アンカレッジ非依存性増殖の特徴である軟寒天培地での増殖能力を示し、ヌードマウスおよび免疫抑制ハムスターの両方で腫瘍形成性を示す。

分子レベルでは、HT-1197は膀胱がんによく見られるいくつかの重要ながん原性変異を有している。HT-1197は、FGFR3の活性化S249C変異とPIK3CAのE545K変異を有しており、これらはいずれも尿路上皮膀胱癌の病態に広くみられる。さらに、HT-1197はNRASのQ61R変異とTERTプロモーター領域の変異を有しており、増殖能とテロメラーゼ活性の亢進を示唆している。TP53の状態にはc.1094A>Gの変異があり、細胞周期の制御とゲノムの安定性の破壊を示唆している。ゲノム・プロファイリングは、HT-1197が、ゲノムの不安定性が高く、膀胱癌のより侵攻性の筋浸潤性サブタイプと一致する分子的特徴を特徴とする尿路上皮癌細胞株のサブセットに属することを示している。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。