Ga naar de inhoud
HT-1197
Weefsel
Urineblaas
Ziekte
Terugkerend blaascarcinoom
Synoniemen
HT 1197, HT1197, HT 1197.T

Documenten

HT-1197

Cell line · Productnummer 305800

HT-1197 is a human urothelial carcinoma cell line established from a high-grade transitional cell carcinoma of the bladder in an adult male patient. This ...

€550.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HT-1197 is een humane urotheliale carcinoma cellijn afkomstig van een hooggradig overgangscelcarcinoom van de blaas bij een volwassen mannelijke patiënt. Deze lijn werd afgeleid van een terugkerende tumor na meerdere chirurgische resecties en vertoonde agressief klinisch gedrag met wijdverspreide uitzaaiingen voorafgaand aan het overlijden van de patiënt. Morfologisch vertonen HT-1197 cellen epitheliale kenmerken, waaronder de aanwezigheid van microvilli, tonofibrillen en desmosomen zoals waargenomen onder elektronenmicroscopie, wat duidt op hun urotheliale epitheliale oorsprong. Deze cellen zijn karyotypisch verschillend met identificeerbare merkerchromosomen en tonen het vermogen om te groeien in zachte agar, een kenmerk van ankerplaatsonafhankelijke groei, en zijn tumorigeen in zowel naakte muizen als hamsters met immunosuppressie.

Op moleculair niveau bevat HT-1197 verschillende belangrijke oncogene mutaties die vaak geassocieerd worden met blaaskanker. Het draagt een activerende S249C mutatie in FGFR3 en een E545K mutatie in PIK3CA, die beide veel voorkomen in de pathogenese van urotheliaal blaascarcinoom. Daarnaast heeft HT-1197 een Q61R-mutatie in NRAS en mutaties in de TERT-promotorregio, wat duidt op een verhoogde proliferatieve capaciteit en telomeraseactiviteit. De TP53 status bevat een c.1094A>G verandering, wat verder duidt op verstoring van de celcycluscontrole en genomische stabiliteit. Genomische profilering geeft aan dat HT-1197 behoort tot een subset van urotheliale kankercellijnen die gekenmerkt worden door een hoge genomische instabiliteit en moleculaire kenmerken die consistent zijn met het agressievere, spierinvasieve subtype blaaskanker.

Weefsel
Urineblaas
Ziekte
Terugkerend blaascarcinoom
Synoniemen
  • HT 1197
  • HT1197
  • HT 1197.T

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Tumorverwekkend
Ja; Ja, bij muizen en hamsters
Verdubbelingstijd
61 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HT-1197 (Cytion catalogusnummer 305800)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1291

05Expressie en vatbaarheid

Iso-enzymen
G6PD, B
Mutatieprofiel
Mutatie: NRAS, eenvoudig, p.Gln61Arg (c.182A>G), niet gespecificeerd. Mutatie, TERT, eenvoudig, c.1-124C>T (c.228C>T) (C228T), niet gespecificeerd, opmerking=in promotor. Mutatie, TP53, eenvoudig, p.His365Arg (c.1094A>G), niet gespecificeerd

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Vloeistofverversing
twee keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
44 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch