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MRC-5
Tissu
Poumon
Synonymes
MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5

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MRC-5

Cell line · Référence du produit 300395

MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...

€430.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

Fabriqué sur commande
1

01Informations générales

Description

Les cellules MRC-5, une lignée cellulaire de fibroblastes pulmonaires humains dérivée du tissu pulmonaire d'un fœtus mâle de 14 semaines en 1966, sont largement utilisées dans la production de certains vaccins, notamment ceux contre l'hépatite A, la polio, la rage, etc.

La sensibilité à divers virus humains, notamment le poliovirus humain 1, le virus de l'herpès simplex et le virus de la stomatite vésiculaire, souligne le rôle des cellules MRC5 dans la découverte d'antiviraux, de vaccins viraux, de la sécurité des vaccins et de la réplication des virus. Les lignées cellulaires MRC-5 et WI-38 sont encore utilisées aujourd'hui pour produire des vaccins contre la varicelle, la rubéole, l'hépatite A et une version du vaccin contre la rage. Récemment, les cellules MRC-5 ont été modifiées pour exprimer le récepteur ACE2 et ont joué un rôle clé dans la recherche sur le SRAS. Les cellules MRC5 humaines ACE2 modifiées permettent aux scientifiques d'étudier la manière dont le virus SARS-CoV pénètre dans les cellules hôtes et s'y réplique. Ces travaux sont essentiels pour comprendre le comportement du virus et mettre au point des agents antiviraux et des traitements ciblés.

L'utilité de la lignée cellulaire fœtale MRC5 va au-delà de la production de vaccins et inclut des rôles potentiels dans la recherche sur le cancer, la lignée cellulaire étant utilisée dans des études explorant le microenvironnement tumoral et les interactions entre les cellules cancéreuses, en raison de leur capacité à se différencier en plusieurs types de cellules, y compris les ostéocytes et les chondrocytes. Cela a donné lieu à des spéculations sur leur similarité avec les cellules souches mésenchymateuses (CSM), étant donné leur morphologie semblable à celle des fibroblastes et le maintien d'un caryotype diploïde normal au cours d'une expansion in vitro extensive.

Tissu
Poumon
Applications
Production de vaccins
Synonymes
  • MRC5
  • MRC 5
  • MRCV
  • MRC-V
  • Medical Research Council cell strain-5

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Type de cellule
Fibroblaste
Caryotype
MRC5 est une lignée cellulaire diploïde avec un nombre modal de chromosomes de 46.

04Identifiants

Référence
MRC-5 (numéro de catalogue Cytion 300395)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0440

05Expression et sensibilité

Sensibilité aux virus
Non sensible à l'infection par le coronavirus 2 du SRAS (SARS-CoV-2) (COVID-19)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
EMEM (MEM Eagle), w : 2 mM L-Glutamine, w : 2.2 g/L NaHCO3, w : EBSS (numéro d'article Cytion 820100a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS et 1 % de NEAA
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Fœtus