
- Kudos
- Keuhkot
- Synonyymit
- MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5
Asiakirjat
MRC-5
Cell line · Tuotenumero 300395
MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...
Räätälöinti / Suositukset
- MRC-5Cell line€430.00
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
MRC-5-soluja, ihmisen keuhkojen fibroblastisolulinjaa, joka on peräisin 14 viikon ikäisen miespuolisen sikiön keuhkokudoksesta vuonna 1966, käytetään laajalti tiettyjen rokotteiden, kuten hepatiitti A:n, polion ja raivotaudin rokotteiden, tuotannossa.
Alttius erilaisille ihmisviruksille, erityisesti ihmisen poliovirus 1:lle, herpes simplex -virukselle ja vesicular stomatitis -virukselle, korostaa MRC5-solujen roolia viruslääkkeiden, virusrokotteiden, rokoteturvallisuuden ja virusten monistumisen löytämisessä. MRC-5- ja WI-38-solulinjoja käytetään yhä nykyäänkin rokotteiden tuottamiseen varicellaa, vihurirokkoa, hepatiitti A:ta ja erästä raivotautirokotteen versiota varten. Äskettäin MRC-5-solut muunnettiin ilmentämään ACE2-reseptoria, ja ne ovat olleet avainasemassa SARS-tutkimuksessa. Muokattujen MRC5-ihmisen ACE2-solujen avulla tutkijat voivat tutkia, miten SARS-CoV-virus pääsee isäntäsoluihin ja lisääntyy niissä. Tämä työ on ollut elintärkeää viruksen käyttäytymisen ymmärtämiseksi ja kohdennettujen viruslääkkeiden ja hoitojen kehittämiseksi.
MRC5-sikiösolulinjan hyöty ulottuu rokotetuotannon lisäksi myös mahdollisiin tehtäviin syöpätutkimuksessa, sillä solulinjaa käytetään tutkimuksissa, joissa tutkitaan kasvaimen mikroympäristöä ja syöpäsolujen vuorovaikutusta, koska solulinja kykenee erilaistumaan useiksi solutyypeiksi, kuten osteosyyteiksi ja kondrosyyteiksi. Tämä on johtanut spekulaatioihin niiden samankaltaisuudesta mesenkymaalisten kantasolujen (MSC) kanssa, kun otetaan huomioon niiden fibroblastien kaltainen morfologia ja normaalin diploidisen karyotyypin säilyminen laajassa in vitro -laajentumisessa.
- Kudos
- Keuhkot
- Sovellukset
- Rokotteen tuotanto
- Synonyymit
- MRC5
- MRC 5
- MRCV
- MRC-V
- Medical Research Council cell strain-5
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Solutyyppi
- Fibroblastit
- Karyotyyppi
- MRC5 on diploidi solulinja, jonka modaalinen kromosomiluku on 46.
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- MRC-5 (Cytionin luettelonumero 300395)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0440
05Ilmentyminen ja alttius
- Viruksille altistuminen
- Ei altis SARS-koronaviruksen 2 (SARS-CoV-2) infektiolle (COVID-19)
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiini, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytionin artikkelinumero 820100a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä ja 1 % NEAA:lla
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- Sikiö
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä