Перейти до вмісту
MRC-5
Тканина
Легені
Синоніми
MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5

Документи

MRC-5

Cell line · Номер товару 300395

MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини MRC-5, клітинні лінії легеневих фібробластів людини, отримані з легеневої тканини 14-тижневого плоду чоловічої статі в 1966 році, широко використовуються у виробництві деяких вакцин, у тому числі проти гепатиту А, поліомієліту, сказу тощо.

Чутливість до різних людських вірусів, зокрема до поліовірусу людини 1, вірусу простого герпесу та вірусу везикулярного стоматиту, підкреслює роль клітин MRC5 у відкритті противірусних препаратів, вірусних вакцин, безпечності вакцин та реплікації вірусів. Клітинні лінії MRC-5 та WI-38 і сьогодні використовуються у виробництві вакцин проти вітряної віспи, краснухи, гепатиту А та однієї з версій вакцини проти сказу. Нещодавно клітини MRC-5 були модифіковані для експресії рецептора АПФ2 і стали ключовими в дослідженні атипової пневмонії. Модифіковані клітини MRC5 людини ace2 дозволяють вченим вивчати, як вірус SARS-CoV проникає і реплікується в клітинах хазяїна. Ця робота є життєво важливою для розуміння поведінки вірусу та розробки цільових противірусних препаратів і методів лікування.

Корисність лінії фетальних клітин MRC5 виходить за рамки виробництва вакцин і включає потенційну роль у дослідженні раку, оскільки клітини цієї лінії використовуються в дослідженнях, що вивчають мікрооточення пухлини та взаємодію ракових клітин, завдяки їх здатності диференціюватися в різні типи клітин, включаючи остеоцити і хондроцити. Це призвело до припущення про їх схожість з мезенхімальними стовбуровими клітинами (МСК), враховуючи їх фібробластоподібну морфологію і збереження нормального диплоїдного каріотипу при екстенсивній експансії in vitro.

Тканина
Легені
Застосування
Виробництво вакцин
Синоніми
  • MRC5
  • MRC 5
  • MRCV
  • MRC-V
  • Medical Research Council cell strain-5

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Тип клітини
Фібробласт
Каріотип
MRC5 - це диплоїдна клітинна лінія з модальним числом хромосом 46.

04Ідентифікатори

Посилання
MRC-5 (номер за каталогом Cytion 300395)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0440

05Експресія та сприйнятливість

Вразливість до вірусів
Не сприйнятливі до інфекції, спричиненої коронавірусом атипової пневмонії 2 (SARS-CoV-2) (COVID-19)

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
Плід