MRC-5

Le cellule MRC-5, una linea cellulare di fibroblasti polmonari umani derivati dal tessuto polmonare di un feto maschio di 14 settimane nel 1966, sono ampiamente utilizzate nella produzione di alcuni vaccini, tra cui quelli per l'epatite A, la poliomielite, la rabbia e altri ancora.

La suscettibilità a vari virus umani, in particolare il poliovirus umano 1, il virus dell'herpes simplex e il virus della stomatite vescicolare, sottolinea il ruolo delle cellule MRC5 nella scoperta di antivirali, vaccini virali, sicurezza dei vaccini e replicazione dei virus. Le linee cellulari MRC-5 e WI-38 sono ancora oggi utilizzate per produrre vaccini per la varicella, la rosolia, l'epatite A e una versione del vaccino contro la rabbia. Recentemente, le cellule MRC-5 sono state modificate per esprimere il recettore ACE2 e sono state fondamentali per la ricerca sulla SARS. Le cellule MRC5 umane ace2 modificate consentono agli scienziati di studiare come il virus SARS-CoV entra e si replica nelle cellule ospiti. Questo lavoro è stato fondamentale per comprendere il comportamento del virus e sviluppare agenti antivirali e trattamenti mirati.

L'utilità della linea cellulare fetale MRC5 va oltre la produzione di vaccini e include ruoli potenziali nella ricerca sul cancro: la linea cellulare è stata impiegata in studi che esplorano il microambiente tumorale e le interazioni tra cellule tumorali, grazie alla capacità di differenziarsi in più tipi di cellule, tra cui osteociti e condrociti. Ciò ha portato a speculazioni sulla loro somiglianza con le cellule staminali mesenchimali (MSC), data la loro morfologia simile a quella dei fibroblasti e il mantenimento di un normale cariotipo diploide nel corso di un'ampia espansione in vitro.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia