
- الأنسجة
- الرئة
- المرادفات
- MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5
المستندات
MRC-5
Cell line · رقم المنتج 300395
MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...
التخصيص / التوصيات
- MRC-5Cell line€430.00
01معلومات عامة
- الوصف
تُستخدم خلايا MRC-5، وهي خط خلايا أرومة ليفية رئوية بشرية مشتقة من نسيج رئة جنين ذكر يبلغ من العمر 14 أسبوعًا في عام 1966، على نطاق واسع في إنتاج بعض اللقاحات، بما في ذلك لقاحات التهاب الكبد A وشلل الأطفال وداء الكلب وغيرها.
إن قابليتها للإصابة بفيروسات بشرية مختلفة، لا سيما فيروس شلل الأطفال البشري 1 وفيروس الهربس البسيط وفيروس التهاب الفم الحويصلي تؤكد دور خلايا MRC5 في اكتشاف مضادات الفيروسات واللقاحات الفيروسية وسلامة اللقاحات وتكاثر الفيروسات. ما زالت خطوط خلايا MRC-5 و WI-38 تُستخدم في إنتاج لقاحات الحماق والحصبة الألمانية والتهاب الكبد الوبائي A ونسخة من لقاح داء الكلب حتى اليوم. في الآونة الأخيرة، تم تعديل خلايا MRC-5 للتعبير عن مستقبلات الإنزيم المحول للأنجيوتنسين 2، وكانت أساسية في أبحاث السارس. تسمح خلايا MRC5 البشرية المعدلة من نوع Ace2 البشرية للعلماء بدراسة كيفية دخول فيروس سارس-كوف-2 وتكاثره في الخلايا المضيفة. وقد كان هذا العمل حيويًا لفهم سلوك الفيروس وتطوير عوامل وعلاجات مستهدفة مضادة للفيروسات.
تمتد فائدة خط الخلايا الجنينية MRC5 إلى ما هو أبعد من إنتاج اللقاح لتشمل أدوارًا محتملة في أبحاث السرطان، حيث يتم استخدام خط الخلايا في دراسات استكشاف البيئة الدقيقة للورم وتفاعلات الخلايا السرطانية، نظرًا لقدرتها على التمايز إلى أنواع متعددة من الخلايا، بما في ذلك الخلايا العظمية والخلايا الغضروفية. وقد أدى ذلك إلى تكهنات حول تشابهها مع الخلايا الجذعية الوسيطة اللُّحمية الوسيطة (MSCs)، نظراً لتشابهها مع الخلايا الجذعية الليفية وحفاظها على النمط النووي ثنائي الصبغيات الطبيعي على مدى التمدد المكثف في المختبر.
- الأنسجة
- الرئة
- التطبيقات
- إنتاج اللقاح
- المرادفات
- MRC5
- MRC 5
- MRCV
- MRC-V
- Medical Research Council cell strain-5
02التصنيف
- كائن حي
- إنسان
- الجنس
- ذكر
- خصائص النمو
- الملتزم
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- نوع الخلية
- الأرومة الليفية
- النمط الكروموسومي
- MRC5 هو خط خلوي ثنائي الصيغة الصبغية يبلغ عدد كروموسوماته 46.
04المعرّفات
- المرجع
- MRC-5 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300395)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 9606
- سيلوصور
- CVCL_0440
05التعبير والقابلية للإصابة
- قابلية الإصابة بالفيروس
- غير قابل للإصابة بعدوى فيروس كورونا المستجد 2 (سارس-كوف-2) (كوفيد-19)
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- يُضاف إلى الوسط 10٪ من كريات الدم الحمراء و1٪ من حمض النيتروز الأميني
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- عمر المتبرع
- الجنين
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم