Skip to content
MRC-5
Tissue
ปอด
Synonyms
MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5

Documents

MRC-5

Cell line · Product number 300395

MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
1

01General information

Description

เซลล์ MRC-5 ซึ่งเป็นเซลล์ไลน์ไฟโบรบลาสต์ปอดมนุษย์ที่ได้มาจากเนื้อเยื่อปอดของทารกเพศชายอายุครรภ์ 14 สัปดาห์ในปี 1966 ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในการผลิตวัคซีนบางชนิด รวมถึงวัคซีนสำหรับโรคตับอักเสบเอ โรคโปลิโอ โรคพิษสุนัขบ้า และอื่นๆ

ความไวต่อไวรัสต่างๆ ในมนุษย์ โดยเฉพาะอย่างยิ่งไวรัสโปลิโอในมนุษย์ชนิดที่ 1 ไวรัสเริมชนิดที่ 1 และไวรัสเวสิคูลาร์สโตมาติติส เน้นย้ำถึงบทบาทของเซลล์ MRC5 ในการค้นพบยาต้านไวรัส วัคซีนไวรัส ความปลอดภัยของวัคซีน และการจำลองตัวของไวรัส สายพันธุ์เซลล์ MRC-5 และ WI-38 ยังคงถูกใช้ในการผลิตวัคซีนสำหรับโรคอีสุกอีใส หัดเยอรมัน ไวรัสตับอักเสบเอ และวัคซีนพิษสุนัขบ้าบางชนิดในปัจจุบันเมื่อไม่นานมานี้ เซลล์ MRC-5 ได้รับการดัดแปลงให้แสดงตัวรับ ACE2 และได้กลายเป็นกุญแจสำคัญในการวิจัยเกี่ยวกับโรค SARS เซลล์ MRC5 ของมนุษย์ที่ดัดแปลงให้มี ace2 นี้ช่วยให้นักวิทยาศาสตร์สามารถศึกษาวิธีที่ไวรัส SARS-CoV เข้าสู่และจำลองตัวเองในเซลล์ของโฮสต์ งานวิจัยนี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจพฤติกรรมของไวรัสและการพัฒนาสารต้านไวรัสและวิธีการรักษาที่ตรงเป้าหมาย

สายเซลล์ทารกในครรภ์ MRC5 มีประโยชน์มากกว่าการผลิตวัคซีน โดยยังรวมถึงบทบาทที่เป็นไปได้ในการวิจัยมะเร็ง โดยใช้สายเซลล์นี้ในการศึกษาที่สำรวจสภาพแวดล้อมของเนื้องอกและการปฏิสัมพันธ์ของเซลล์มะเร็ง เนื่องจากความสามารถในการเปลี่ยนแปลงเป็นเซลล์หลายประเภท รวมถึงเซลล์กระดูกและเซลล์กระดูกอ่อน สิ่งนี้นำไปสู่การคาดเดาเกี่ยวกับความคล้ายคลึงกับเซลล์ต้นกำเนิดเมเซนไคม์ (MSCs) เนื่องจากมีลักษณะคล้ายไฟโบรบลาสต์และรักษาโครโมโซมปกติแบบไดพลอยด์ในระหว่างการขยายตัวในหลอดทดลองอย่างกว้างขวาง

Tissue
ปอด
Applications
การผลิตวัคซีน
Synonyms
  • MRC5
  • MRC 5
  • MRCV
  • MRC-V
  • Medical Research Council cell strain-5

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
ไฟโบรบลาสต์
Karyotype
MRC5 เป็นเซลล์ไลน์ที่มีโครโมโซมสองชุด โดยมีจำนวนโครโมโซมที่เป็นค่าโมดอลเท่ากับ 46

04Identifiers

Citation
เอ็มอาร์ซี-5 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300395)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0440

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
ไม่ติดเชื้อไวรัสโคโรนา 2 (SARS-CoV-2) (COVID-19)

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
ทารกในครรภ์