Skip to content
MRC-5
Tissue
ריאה
Synonyms
MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5

Documents

MRC-5

Cell line · Product number 300395

MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...

US$395.00excl. tax and shipping
Made to order
1

01General information

Description

תאי MRC-5, קו תאים פיברובלסטיים של ריאות אנושיות שמקורם ברקמת ריאה של עובר זכר בן 14 שבועות משנת 1966, משמשים באופן נרחב בייצור חיסונים מסוימים, כולל חיסונים נגד הפטיטיס A, פוליו, כלבת ועוד.

הרגישות למגוון נגיפים אנושיים, ובפרט נגיף הפוליו האנושי 1, נגיף הרפס סימפלקס ונגיף סטומטיטיס וסיקולרי, מדגישה את תפקידם של תאי MRC5 בגילוי תרופות אנטי-ויראליות, חיסונים ויראליים, בטיחות חיסונים ושכפול נגיפים. קווי תאים MRC-5 ו-WI-38 עדיין משמשים בייצור חיסונים נגד אבעבועות רוח, אדמת, הפטיטיס A וגרסה של חיסון נגד כלבת. לאחרונה, תאי MRC-5 שונו כדי לבטא את הקולטן ACE2, והם היו מרכזיים במחקר על SARS. תאי ace2 האנושיים המשונים MRC5 מאפשרים למדענים לחקור כיצד נגיף SARS-CoV נכנס ומתרבה בתאי מארח. עבודה זו הייתה חיונית להבנת התנהגות הנגיף ולפיתוח חומרים וטיפולים אנטי-ויראליים ממוקדים.

השימוש בקו התאים העובריים MRC5 חורג מייצור חיסונים וכולל תפקידים פוטנציאליים במחקר הסרטן, כאשר קו התאים משמש במחקרים הבוחנים את הסביבה המיקרו-סביבתית של הגידול ואת האינטראקציות בין תאי הסרטן, בשל יכולתם להתמיין לסוגים שונים של תאים, כולל אוסטאוציטים וכונדרוציטים. דבר זה הוביל לספקולציות לגבי הדמיון שלהם לתאי גזע מזנכימליים (MSCs), לאור המורפולוגיה הדומה לפיברובלסטים ושמירת הקריוטיפ הדיפלואידי הנורמלי במהלך התרחבות נרחבת במבחנה.

Tissue
ריאה
Applications
ייצור חיסונים
Synonyms
  • MRC5
  • MRC 5
  • MRCV
  • MRC-V
  • Medical Research Council cell strain-5

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
פיברובלסט
Karyotype
MRC5 הוא קו תאים דיפלואידי עם מספר כרומוזומים מודאלי של 46.

04Identifiers

Citation
MRC-5 (מספר קטלוגי Cytion 300395)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0440

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
לא רגיש לזיהום בנגיף הקורונה SARS 2 (SARS-CoV-2) (COVID-19)

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
עובר