
- Tissue
- ריאה
- Synonyms
- MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5
Documents
MRC-5
Cell line · Product number 300395
MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...
01General information
- Description
תאי MRC-5, קו תאים פיברובלסטיים של ריאות אנושיות שמקורם ברקמת ריאה של עובר זכר בן 14 שבועות משנת 1966, משמשים באופן נרחב בייצור חיסונים מסוימים, כולל חיסונים נגד הפטיטיס A, פוליו, כלבת ועוד.
הרגישות למגוון נגיפים אנושיים, ובפרט נגיף הפוליו האנושי 1, נגיף הרפס סימפלקס ונגיף סטומטיטיס וסיקולרי, מדגישה את תפקידם של תאי MRC5 בגילוי תרופות אנטי-ויראליות, חיסונים ויראליים, בטיחות חיסונים ושכפול נגיפים. קווי תאים MRC-5 ו-WI-38 עדיין משמשים בייצור חיסונים נגד אבעבועות רוח, אדמת, הפטיטיס A וגרסה של חיסון נגד כלבת. לאחרונה, תאי MRC-5 שונו כדי לבטא את הקולטן ACE2, והם היו מרכזיים במחקר על SARS. תאי ace2 האנושיים המשונים MRC5 מאפשרים למדענים לחקור כיצד נגיף SARS-CoV נכנס ומתרבה בתאי מארח. עבודה זו הייתה חיונית להבנת התנהגות הנגיף ולפיתוח חומרים וטיפולים אנטי-ויראליים ממוקדים.
השימוש בקו התאים העובריים MRC5 חורג מייצור חיסונים וכולל תפקידים פוטנציאליים במחקר הסרטן, כאשר קו התאים משמש במחקרים הבוחנים את הסביבה המיקרו-סביבתית של הגידול ואת האינטראקציות בין תאי הסרטן, בשל יכולתם להתמיין לסוגים שונים של תאים, כולל אוסטאוציטים וכונדרוציטים. דבר זה הוביל לספקולציות לגבי הדמיון שלהם לתאי גזע מזנכימליים (MSCs), לאור המורפולוגיה הדומה לפיברובלסטים ושמירת הקריוטיפ הדיפלואידי הנורמלי במהלך התרחבות נרחבת במבחנה.
- Tissue
- ריאה
- Applications
- ייצור חיסונים
- Synonyms
- MRC5
- MRC 5
- MRCV
- MRC-V
- Medical Research Council cell strain-5
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- פיברובלסט
- Karyotype
- MRC5 הוא קו תאים דיפלואידי עם מספר כרומוזומים מודאלי של 46.
04Identifiers
- Citation
- MRC-5 (מספר קטלוגי Cytion 300395)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0440
05Expression and susceptibility
- Virus susceptibility
- לא רגיש לזיהום בנגיף הקורונה SARS 2 (SARS-CoV-2) (COVID-19)
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- עובר
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes