Gå til innholdet
MRC-5
Vev
Lunge
Synonymer
MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5

Dokumenter

MRC-5

Cell line · Produktnummer 300395

MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

Lages på bestilling
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

MRC-5-celler, en human lungefibroblastcellelinje som ble avledet fra lungevevet til et 14 uker gammelt mannlig foster i 1966, brukes i stor utstrekning i produksjonen av visse vaksiner, inkludert vaksiner mot hepatitt A, polio, rabies med mer.

MRC5-cellenes mottakelighet for ulike humane virus, særlig humant poliovirus 1, herpes simplex-virus og vesikulært stomatittvirus, understreker MRC5-cellenes rolle i oppdagelsen av antivirale midler, virusvaksiner, vaksinesikkerhet og virusreplikasjon. MRC-5- og WI-38-cellelinjer brukes fortsatt i dag til å produsere vaksiner mot varicella, røde hunder, hepatitt A og en versjon av rabiesvaksine. Nylig ble MRC-5-celler modifisert til å uttrykke ACE2-reseptoren, og de har spilt en nøkkelrolle i forskningen på SARS. De modifiserte MRC5 humane ace2-cellene gjør det mulig for forskere å studere hvordan SARS-CoV-viruset kommer inn i og replikerer seg i vertsceller. Dette arbeidet har vært avgjørende for å forstå virusets atferd og utvikle målrettede antivirale midler og behandlinger.

MRC5-cellelinjens nytteverdi strekker seg lenger enn til vaksineproduksjon, og omfatter også potensielle roller innen kreftforskning, der cellelinjen brukes i studier som utforsker tumormikromiljøet og interaksjoner mellom kreftceller, på grunn av cellelinjens evne til å differensiere til flere celletyper, inkludert osteocytter og kondrocytter. Dette har ført til spekulasjoner om likheten med mesenkymale stamceller (MSC), på grunn av den fibroblastlignende morfologien og opprettholdelsen av en normal diploid karyotype gjennom omfattende in vitro-ekspansjon.

Vev
Lunge
Søknader
Vaksineproduksjon
Synonymer
  • MRC5
  • MRC 5
  • MRCV
  • MRC-V
  • Medical Research Council cell strain-5

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celletype
Fibroblast
Karyotype
MRC5 er en diploid cellelinje med et modalt kromosomtall på 46.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MRC-5 (Cytion katalognummer 300395)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0440

05Uttrykk og mottakelighet

Virusfølsomhet
Ikke mottakelig for SARS-virus 2 (SARS-CoV-2)-infeksjon (COVID-19)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
Foster