MRC-5

Las células MRC-5, una línea celular de fibroblastos pulmonares humanos derivada del tejido pulmonar de un feto varón de 14 semanas de edad en 1966, se utilizan ampliamente en la producción de determinadas vacunas, incluidas las de la hepatitis A, la poliomielitis y la rabia, entre otras.

La susceptibilidad a diversos virus humanos, en particular el poliovirus humano 1, el virus del herpes simple y el virus de la estomatitis vesicular, subraya el papel de las células MRC5 en el descubrimiento de antivirales, vacunas víricas, seguridad de las vacunas y replicación de virus. Las líneas celulares MRC-5 y WI-38 se siguen utilizando hoy en día para producir vacunas contra la varicela, la rubéola, la hepatitis A y una versión de la vacuna contra la rabia. Recientemente, las células MRC-5 fueron modificadas para expresar el receptor ACE2, y han sido clave en la investigación del SARS. Las células MRC5 ace2 humanas modificadas permiten a los científicos estudiar cómo el virus del SRAS-CoV entra y se replica en las células huésped. Este trabajo ha sido vital para comprender el comportamiento del virus y desarrollar agentes antivirales y tratamientos específicos.

La utilidad de la línea celular fetal MRC5 va más allá de la producción de vacunas e incluye posibles funciones en la investigación del cáncer, ya que la línea celular se emplea en estudios que exploran el microentorno tumoral y las interacciones entre células cancerosas, debido a su capacidad para diferenciarse en múltiples tipos celulares, incluidos osteocitos y condrocitos. Esto ha llevado a especular sobre su similitud con las células madre mesenquimales (MSC), dada su morfología similar a la de los fibroblastos y el mantenimiento de un cariotipo diploide normal a lo largo de una amplia expansión in vitro.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía