Gå direkte til indholdet
MRC-5
Væv
Lunge
Synonymer
MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5

Dokumenter

MRC-5

Cell line · Varenummer 300395

MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

MRC-5-celler, en human lungefibroblastcellelinje, der blev afledt af lungevævet fra et 14 uger gammelt mandligt foster i 1966, bruges i vid udstrækning til produktion af visse vacciner, herunder dem mod hepatitis A, polio, rabies med mere.

Modtageligheden over for forskellige humane vira, især human poliovirus 1, herpes simplex-virus og vesikulær stomatitis-virus, understreger MRC5-cellernes rolle i opdagelsen af antivirale midler, virusvacciner, vaccinesikkerhed og virusreplikation. MRC-5- og WI-38-cellelinjer bruges stadig til at producere vacciner mod varicella, rubella, hepatitis A og en version af rabiesvaccinen i dag. For nylig blev MRC-5-celler modificeret til at udtrykke ACE2-receptoren, og de har været vigtige i SARS-forskningen. De modificerede MRC5 humane ace2-celler gør det muligt for forskere at studere, hvordan SARS-CoV-virus kommer ind i og formerer sig i værtsceller. Dette arbejde har været afgørende for at forstå virussens adfærd og udvikle målrettede antivirale midler og behandlinger.

MRC5-fostercellelinjens anvendelighed rækker ud over vaccineproduktion og omfatter potentielle roller i kræftforskning, hvor cellelinjen anvendes i undersøgelser, der udforsker tumormikromiljøet og kræftcelleinteraktioner, på grund af deres evne til at differentiere sig til flere celletyper, herunder osteocytter og kondrocytter. Dette har ført til spekulationer om deres lighed med mesenkymale stamceller (MSC'er) på grund af deres fibroblastlignende morfologi og opretholdelse af en normal diploid karyotype over omfattende in vitro-ekspansion.

Væv
Lunge
Anvendelser
Produktion af vacciner
Synonymer
  • MRC5
  • MRC 5
  • MRCV
  • MRC-V
  • Medical Research Council cell strain-5

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Celletype
Fibroblast
Karyotype
MRC5 er en diploid cellelinje med et modalt kromosomtal på 46.

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MRC-5 (Cytion katalognummer 300395)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0440

05Udtryk og modtagelighed

Virusfølsomhed
Ikke modtagelig for SARS coronavirus 2 (SARS-CoV-2) infektion (COVID-19)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Foster