
- Væv
- Lunge
- Synonymer
- MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5
Dokumenter
MRC-5
Cell line · Varenummer 300395
MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...
Tilpasning / Anbefalinger
- MRC-5Cell line€430.00
01Generelle oplysninger
- Beskrivelse
MRC-5-celler, en human lungefibroblastcellelinje, der blev afledt af lungevævet fra et 14 uger gammelt mandligt foster i 1966, bruges i vid udstrækning til produktion af visse vacciner, herunder dem mod hepatitis A, polio, rabies med mere.
Modtageligheden over for forskellige humane vira, især human poliovirus 1, herpes simplex-virus og vesikulær stomatitis-virus, understreger MRC5-cellernes rolle i opdagelsen af antivirale midler, virusvacciner, vaccinesikkerhed og virusreplikation. MRC-5- og WI-38-cellelinjer bruges stadig til at producere vacciner mod varicella, rubella, hepatitis A og en version af rabiesvaccinen i dag. For nylig blev MRC-5-celler modificeret til at udtrykke ACE2-receptoren, og de har været vigtige i SARS-forskningen. De modificerede MRC5 humane ace2-celler gør det muligt for forskere at studere, hvordan SARS-CoV-virus kommer ind i og formerer sig i værtsceller. Dette arbejde har været afgørende for at forstå virussens adfærd og udvikle målrettede antivirale midler og behandlinger.
MRC5-fostercellelinjens anvendelighed rækker ud over vaccineproduktion og omfatter potentielle roller i kræftforskning, hvor cellelinjen anvendes i undersøgelser, der udforsker tumormikromiljøet og kræftcelleinteraktioner, på grund af deres evne til at differentiere sig til flere celletyper, herunder osteocytter og kondrocytter. Dette har ført til spekulationer om deres lighed med mesenkymale stamceller (MSC'er) på grund af deres fibroblastlignende morfologi og opretholdelse af en normal diploid karyotype over omfattende in vitro-ekspansion.
- Væv
- Lunge
- Anvendelser
- Produktion af vacciner
- Synonymer
- MRC5
- MRC 5
- MRCV
- MRC-V
- Medical Research Council cell strain-5
02Klassificering
- Organisme
- Menneske
- Køn
- Mand
- Vækstegenskaber
- Tilhænger
- Biosikkerhedsniveau
- 1
03Egenskaber
- Celletype
- Fibroblast
- Karyotype
- MRC5 er en diploid cellelinje med et modalt kromosomtal på 46.
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- MRC-5 (Cytion katalognummer 300395)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0440
05Udtryk og modtagelighed
- Virusfølsomhed
- Ikke modtagelig for SARS coronavirus 2 (SARS-CoV-2) infektion (COVID-19)
06Håndtering og opdræt
- Næringsmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosfære
37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.
- Kosttilskud
- Suppler mediet med 10% FBS og 1% NEAA
- Dissociationsreagens
- Accutase
- Oddyrkning
- Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
- Optøning og dyrkning
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitetskontrol og kryopræservering
- Sterilitet
Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.
For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.
- Frysemedium
- Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
- Opbevaringsbetingelser
For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.
- Leveringsbetingelser
Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.
08Donor
- Donorens alder
- Foster
09Juridiske forhold og sikkerhed
- Sikkerhedsforanstaltninger
- Når man planlægger at opbevare et kryovæske i flydende nitrogen med henblik på fremtidig optøning, er det obligatorisk at overholde strenge sikkerhedsforanstaltninger. Passende beskyttelseshandsker og -tøj er afgørende, og der skal bruges ansigtsmaske eller sikkerhedsbriller under overførslen af frosne prøver til eller fra tanken med flydende nitrogen. Dette er for at mindske risikoen for skader fra potentielle kryovæskeeksplosioner ved fjernelse, som kan resultere i projektion af skarpe fragmenter.
- Garanti
Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket
For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Der kræves en aftale om overførsel af materiale
- Ja