Gå direkt till innehållet
MRC-5
Vävnad
Lungan
Synonymer
MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5

MRC-5

Cell line · Produktnummer 300395

MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...

€430.00exkl. moms och frakt
Tillverkas på beställning
1

01Allmän information

Beskrivning

MRC-5-celler, en human lungfibroblastcellinje som 1966 härrörde från lungvävnaden hos ett 14 veckor gammalt manligt foster, används i stor utsträckning vid framställning av vissa vacciner, bland annat mot hepatit A, polio och rabies.

Känsligheten för olika mänskliga virus, särskilt humant poliovirus 1, herpes simplex-virus och vesikulärt stomatitvirus, understryker MRC5-cellernas roll i upptäckten av antivirala medel, virusvacciner, vaccinsäkerhet och virusreplikation. MRC-5- och WI-38-cellinjer används än idag för att producera vacciner mot varicella, röda hund, hepatit A och en version av rabiesvaccin. Nyligen modifierades MRC-5-cellerna så att de uttrycker ACE2-receptorn, och de har spelat en nyckelroll i SARS-forskningen. De modifierade MRC5 human ace2-cellerna gör det möjligt för forskare att studera hur SARS-CoV-viruset tar sig in i och replikeras i värdceller. Detta arbete har varit avgörande för att förstå virusets beteende och för att utveckla riktade antivirala medel och behandlingar.

MRC5-cellinjens användbarhet sträcker sig bortom vaccinproduktion och inkluderar potentiella roller inom cancerforskning, där cellinjen används i studier som utforskar tumörens mikromiljö och interaktioner mellan cancerceller, på grund av deras förmåga att differentiera till flera olika celltyper, inklusive osteocyter och kondrocyter. Detta har lett till spekulationer om deras likhet med mesenkymala stamceller (MSC), med tanke på deras fibroblastliknande morfologi och bibehållande av en normal diploid karyotyp under omfattande in vitro-expansion.

Vävnad
Lungan
Ansökningar
Vaccinproduktion
Synonymer
  • MRC5
  • MRC 5
  • MRCV
  • MRC-V
  • Medical Research Council cell strain-5

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Celltyp
Fibroblast
Karyotyp
MRC5 är en diploid cellinje med ett modalt kromosomnummer på 46.

04Identifierare

Källa
MRC-5 (Cytion katalognummer 300395)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0440

05Uttryck och mottaglighet

Virusmottaglighet
Inte mottaglig för infektion med SARS coronavirus 2 (SARS-CoV-2) (COVID-19)

06Hantering och odling

Odlingsmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
Foster