- Tissue
- 肺
- Synonyms
- MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5
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MRC-5
Cell line · Product number 300395
MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...
01General information
- Description
MRC-5 細胞是一種源自 1966 年一名 14 週大男胎肺組織的人類肺成纖維細胞系，廣泛應用於某些疫苗的生產，包括甲型肝炎、小兒麻痺、狂犬病等疫苗。
該細胞對多種人類病毒（尤其是人類第1型小兒麻痺病毒、單純疱疹病毒及水疱性口炎病毒）的易感性，凸顯了 MRC-5 細胞在抗病毒藥物、病毒疫苗研發、疫苗安全性及病毒複製研究中的重要作用。 時至今日，MRC-5 和 WI-38 細胞系仍被用於生產水痘、風疹、甲型肝炎疫苗，以及某種型號的狂犬病疫苗。 近期，MRC-5 細胞經改造後可表達 ACE2 受體，並在 SARS 研究中發揮關鍵作用。經改造的 MRC-5 人源 ACE2 細胞使科學家得以研究 SARS-CoV 病毒如何侵入宿主細胞並在其中複製。這項工作對於理解病毒的行為模式，以及開發針對性的抗病毒藥物和治療方法至關重要。
MRC5 胎兒細胞系的應用範圍不僅限於疫苗生產，更延伸至癌症研究領域。由於該細胞系具有分化為多種細胞類型（包括骨細胞和軟骨細胞）的能力，因此被運用於探索腫瘤微環境與癌細胞相互作用的研究中。 鑑於其類成纖維細胞的形態，以及在長時間體外擴增過程中仍能維持正常的二倍體核型，這引發了人們對其與間充質幹細胞（MSCs）相似性的推測。
- Tissue
- 肺
- Applications
- 疫苗生產
- Synonyms
- MRC5
- MRC 5
- MRCV
- MRC-V
- Medical Research Council cell strain-5
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Cell type
- 成纖維細胞
- Karyotype
- MRC5 是一種二倍體細胞系，其模態染色體數為 46。
04Identifiers
- Citation
- MRC-5（Cytion 型號 300395）
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0440
05Expression and susceptibility
- Virus susceptibility
- 不易感染嚴重急性呼吸道綜合症冠狀病毒 2 型（SARS-CoV-2）（COVID-19）
06Handling and culture
- Culture medium
- EMEM（MEM Eagle），含 2 mM L-谷氨醯胺，含 2.2 g/L NaHCO₃，含 EBSS（Cytion 產品編號 820100a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 胎兒
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes