Skip to content
MRC-5
Tissue
Phổi
Synonyms
MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5

Documents

MRC-5

Cell line · Product number 300395

MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
1

01General information

Description

Tế bào MRC-5, một dòng tế bào sợi phổi người được phân lập từ mô phổi của một thai nhi nam 14 tuần tuổi vào năm 1966, được sử dụng rộng rãi trong sản xuất một số loại vắc-xin, bao gồm vắc-xin phòng viêm gan A, bại liệt, dại và nhiều loại khác.

Sự nhạy cảm với các virus người, đặc biệt là virus polio người type 1, virus herpes simplex và virus viêm miệng mụn nước, nhấn mạnh vai trò của tế bào MRC-5 trong việc phát hiện các thuốc chống virus, vắc-xin virus, an toàn vắc-xin và sự nhân lên của virus. Các dòng tế bào MRC-5 và WI-38 vẫn được sử dụng trong sản xuất vắc-xin cho bệnh thủy đậu, sởi, viêm gan A và một phiên bản vắc-xin dại ngày nay. Gần đây, các tế bào MRC-5 đã được biến đổi để biểu hiện thụ thể ACE2 và đóng vai trò quan trọng trong nghiên cứu về SARS. Các tế bào MRC5 người ACE2 biến đổi cho phép các nhà khoa học nghiên cứu cách virus SARS-CoV xâm nhập và nhân lên trong tế bào chủ. Công trình này đã đóng vai trò quan trọng trong việc hiểu rõ hành vi của virus và phát triển các tác nhân kháng virus và phương pháp điều trị mục tiêu.

Tính ứng dụng của dòng tế bào phôi MRC5 không chỉ giới hạn trong sản xuất vắc-xin mà còn mở rộng sang các vai trò tiềm năng trong nghiên cứu ung thư, với dòng tế bào này được sử dụng trong các nghiên cứu về môi trường vi mô của khối u và tương tác giữa các tế bào ung thư, nhờ khả năng phân hóa thành nhiều loại tế bào, bao gồm osteocytes và chondrocytes. Điều này đã dẫn đến suy đoán về sự tương đồng của chúng với tế bào gốc trung mô (MSCs), do hình thái tương tự tế bào sợi và duy trì karyotype lưỡng bội bình thường trong quá trình mở rộng in vitro kéo dài.

Tissue
Phổi
Applications
Sản xuất vắc-xin
Synonyms
  • MRC5
  • MRC 5
  • MRCV
  • MRC-V
  • Medical Research Council cell strain-5

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
Tế bào sợi
Karyotype
MRC5 là một dòng tế bào lưỡng bội có số lượng nhiễm sắc thể trung bình là 46.

04Identifiers

Citation
MRC-5 (Số catalog Cytion 300395)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0440

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
Không dễ bị nhiễm virus SARS-CoV-2 (COVID-19)

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), chứa: 2 mM L-Glutamine, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung vào môi trường nuôi cấy 10% huyết thanh bò phôi (FBS) và 1% NEAA
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
Thai nhi