Preskoči na vsebino
MRC-5
Tkivo
Pljuča
Sinonimi
MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5

Dokumenti

MRC-5

Cell line · Številka izdelka 300395

MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Po naročilu
1

01Splošne informacije

Opis

Celice MRC-5, celična linija človeških pljučnih fibroblastov, pridobljena iz pljučnega tkiva 14 tednov starega moškega ploda leta 1966, se pogosto uporablja pri proizvodnji nekaterih cepiv, vključno s cepivi proti hepatitisu A, otroški paralizi, steklini in drugim.

Občutljivost na različne človeške viruse, zlasti na človeški poliovirus 1, virus herpes simpleksa in virus vezikularnega stomatitisa, poudarja vlogo celic MRC5 pri odkrivanju protivirusnih zdravil, virusnih cepiv, varnosti cepiv in replikaciji virusov. Celične linije MRC-5 in WI-38 se še vedno uporabljajo za izdelavo cepiv proti varicelli, rdečkam, hepatitisu A in različice cepiva proti steklini. Pred kratkim so bile celice MRC-5 spremenjene tako, da izražajo receptor ACE2, in so bile ključne pri raziskavah SARS. Modificirane človeške celice MRC5 z ace2 znanstvenikom omogočajo preučevanje, kako virus SARS-CoV vstopa v gostiteljske celice in se v njih razmnožuje. To delo je ključnega pomena za razumevanje obnašanja virusa ter razvoj ciljno usmerjenih protivirusnih sredstev in zdravljenja.

Uporabnost fetalne celične linije MRC5 presega proizvodnjo cepiv in vključuje potencialno vlogo pri raziskavah raka, saj se celična linija zaradi svoje sposobnosti diferenciacije v več vrst celic, vključno z osteociti in hondrociti, uporablja v študijah, ki preučujejo tumorsko mikrookolje in interakcije med rakavimi celicami. To je povzročilo domneve o njihovi podobnosti z mezenhimskimi matičnimi celicami (MSC) zaradi njihove morfologije, podobne fibroblastom, in ohranjanja normalnega diploidnega kariotipa med obsežno in vitro širitvijo.

Tkivo
Pljuča
Uporaba
Proizvodnja cepiva
Sinonimi
  • MRC5
  • MRC 5
  • MRCV
  • MRC-V
  • Medical Research Council cell strain-5

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Vrsta celice
Fibroblast
Kariotip
MRC5 je diploidna celična linija z modalnim številom kromosomov 46.

04Identifikatorji

Navajanje vira
MRC-5 (kataloška številka Cytion 300395)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0440

05Izražanje in dovzetnost

Občutljivost na virus
Ni dovzeten za okužbo s koronavirusom SARS 2 (SARS-CoV-2) (COVID-19)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (številka izdelka Cytion 820100a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS in 1 % NEAA
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Plod