İçeriğe atla
MRC-5
Doku
Akciğer
Eş anlamlılar
MRC5, MRC 5, MRCV, MRC-V, Medical Research Council cell strain-5

MRC-5

Cell line · Ürün numarası 300395

MRC-5 cells, a human lung fibroblast cell line derived from the lung tissue of a 14-week-old male fetus in 1966, are extensively utilized in the productio...

€430.00vergi ve kargo hariç
Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama

1966 yılında 14 haftalık bir erkek fetüsün akciğer dokusundan elde edilen bir insan akciğer fibroblast hücre hattı olan MRC-5 hücreleri, hepatit A, çocuk felci, kuduz ve daha fazlası için olanlar da dahil olmak üzere bazı aşıların üretiminde yaygın olarak kullanılmaktadır.

Başta insan poliovirüs 1, herpes simpleks virüsü ve veziküler stomatit virüsü olmak üzere çeşitli insan virüslerine karşı duyarlılık, MRC5 hücrelerinin antivirallerin, viral aşıların, aşı güvenliğinin ve virüs replikasyonunun keşfindeki rolünün altını çizmektedir. MRC-5 ve WI-38 hücre hatları bugün hala suçiçeği, kızamıkçık, hepatit A ve kuduz aşısının bir versiyonu için aşı üretiminde kullanılmaktadır. Son zamanlarda MRC-5 hücreleri ACE2 reseptörünü ifade edecek şekilde modifiye edilmiş ve SARS araştırmalarında kilit rol oynamıştır. Modifiye edilmiş MRC5 insan ace2 hücreleri, bilim insanlarının SARS-CoV virüsünün konak hücrelere nasıl girdiğini ve çoğaldığını incelemelerine olanak sağlamaktadır. Bu çalışma, virüsün davranışını anlamak ve hedefe yönelik antiviral ajanlar ve tedaviler geliştirmek için hayati önem taşımaktadır.

MRC5 fetal hücre hattının faydası, osteositler ve kondrositler de dahil olmak üzere birden fazla hücre tipine farklılaşma kabiliyetleri sayesinde, tümör mikroçevresini ve kanser hücresi etkileşimlerini araştıran çalışmalarda kullanılan hücre hattı ile aşı üretiminin ötesine geçerek kanser araştırmalarındaki potansiyel rolleri de içermektedir. Bu durum, fibroblast benzeri morfolojileri ve kapsamlı in vitro genişleme boyunca normal diploid karyotipi korumaları nedeniyle mezenkimal kök hücrelere (MSC'ler) benzerlikleri hakkında spekülasyonlara yol açmıştır.

Doku
Akciğer
Uygulamalar
Aşı üretimi
Eş anlamlılar
  • MRC5
  • MRC 5
  • MRCV
  • MRC-V
  • Medical Research Council cell strain-5

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Hücre türü
Fibroblast
Karyotip
MRC5, modal kromozom sayısı 46 olan diploid bir hücre hattıdır.

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MRC-5 (Cytion katalog numarası 300395)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0440

05İfade ve duyarlılık

Virüse karşı duyarlılık
SARS koronavirüs 2 (SARS-CoV-2) enfeksiyonuna duyarlı değil (COVID-19)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
Fetüs