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NR8383
Tissu
Poumon
Synonymes
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

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NR8383

Cell line · Référence du produit 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00hors taxes et frais de port
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Lot
Recommandé (lot le plus récent)
  • CoA
1

01Informations générales

Description
Les cellules ont été cultivées en présence de milieu conditionné de cellules pulmonaires de gerbille pendant environ 8 à 9 mois.Par la suite, le besoin de facteurs de croissance exogènes a disparu.Les cellules présentent les caractéristiques des cellules macrophages.Phagocytose du zymosan et de Pseudomonas aeruginosa, activité estérase non spécifique, récepteurs Fc, rafale oxydative, sécrétion d'IL-1, de TNF bêta et d'IL-6, et réponse réplicative aux facteurs de croissance exogènes.Les cellules répondent aux stimuli microbiens, particulaires ou solubles appropriés par la phagocytose et la destruction.Les cellules NR8383 répondent à la bléomycine en sécrétant un facteur de croissance transformant latent (TGF bêta).La stimulation par la bléomycine augmente également l'expression de l'ARNm du TGF bêta.Ces cellules sont sensibles à l'endotoxine.Des niveaux de LPS de 1 à 10 ng/mL inhibent la réplication de 50 %.L'inhibition du LPS est non toxique et réversible même après des niveaux allant jusqu'à 0,001mg/mL pendant des périodes prolongées.
Tissu
Poumon
Synonymes
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Classification

Organisme
Rat
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adhérent et en suspension
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Macrophage

04Identifiants

Référence
NR8383 (numéro 305200 du catalogue Cytion)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Expression et sensibilité

Récepteurs exprimés
Fc
Expression des protéines
Facteur de croissance transformant bêta (Tgf bêta), interleukine 1 (Il-1), interleukine 6 (Il-6)

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 15 % de FBS inactivé à la chaleur
Réactif de dissociation
Accutase, uniquement des cellules adhérentes, les cellules flottantes doivent être collectées séparément.
Repiquage
Rassembler les cellules en suspension dans un tube de 15 ml et laver délicatement les cellules adhérentes avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium (utiliser 3-5 ml pour les flacons T25 et 5-10 ml pour les flacons T75). Appliquer Accutase (1-2 ml pour les flacons T25, 2,5 ml pour les flacons T75) en veillant à couvrir entièrement la couche cellulaire. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 10 minutes. Après l'incubation, combiner et centrifuger la suspension et les cellules adhérentes. Après centrifugation, remettre soigneusement en suspension le culot cellulaire et transférer la suspension cellulaire dans de nouveaux flacons contenant du milieu frais.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
Sprague Dawley
Âge du donneur
Adulte