Ga naar de inhoud
NR8383
Weefsel
Long
Synoniemen
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Documenten

NR8383

Cell line · Productnummer 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving
De cellen werden gekweekt in de aanwezigheid van gerbil longcel geconditioneerd medium voor ongeveer 8 tot 9 maanden.Vervolgens werd de behoefte aan exogene groeifactoren verloren.De cellen vertonen kenmerken van macrofaagcellen.Fagocytose van zymosan en Pseudomonas aeruginosa, niet-specifieke esterase activiteit, Fc receptoren, oxidatieve burst, IL-1, TNF beta en IL-6 afscheiding, en replicatieve respons op exogene groeifactoren.De cellen reageren op geschikte microbiële, deeltjesvormige of oplosbare stimuli met fagocytose en doding.NR8383-cellen reageren op bleomycine door latente transformerende groeifactor (TGF beta) uit te scheiden.Stimulatie met bleomycine verhoogt ook de expressie van TGF beta mRNA.Deze cellen zijn gevoelig voor endotoxine.LPS-niveaus van 1 tot 10 ng/mL remmen de replicatie met 50%.LPS-remming is niet-toxisch en reversibel, zelfs na niveaus tot 0,001mg/mL gedurende langere perioden.
Weefsel
Long
Synoniemen
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Classificatie

Organisme
Rat
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Adhesie en suspensie
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Macrofaag

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
NR8383 (Cytion catalogusnummer 305200)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Expressie en vatbaarheid

Tot expressie gebrachte receptoren
Fc
Eiwit-expressie
Transformerende groeifactor Beta (Tgf Beta), interleukine 1 (Il-1), interleukine 6 (Il-6)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 15% hitte-geïnactiveerde FBS
Dissociatiereagens
Accutase, alleen van de aanhangende cellen, zwevende cellen moeten apart worden verzameld.
Heruitplanten
Verzamel de suspensiecellen in een buis van 15 ml en was de aanhangende cellen voorzichtig met PBS zonder calcium en magnesium (gebruik 3-5 ml voor T25-flesjes en 5-10 ml voor T75-flesjes). Breng Accutase aan (1-2 ml voor T25-flesjes, 2,5 ml voor T75-flesjes) en zorg dat de cellaag volledig bedekt wordt. Laat de cellen 10 minuten bij kamertemperatuur incuberen. Na de incubatie zowel de suspensie als de aanhangende cellen combineren en centrifugeren. Na het centrifugeren de celpellet voorzichtig resuspenderen en de celsuspensie overbrengen in nieuwe kolven met vers medium.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
Sprague Dawley
Leeftijd van de donor
Volwassen