Pāriet uz saturu
NR8383
Audums
Plaušas
Sinonīmi
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Dokumenti

NR8383

Cell line · Preces numurs 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts
Šūnas tika kultivētas ar gerbilas plaušu šūnu kondicionētu barotni aptuveni 8 līdz 9 mēnešus.Pēc tam prasība pēc eksogēniem augšanas faktoriem tika zaudēta.Šūnām piemīt makrofāgu šūnu īpašības.Makrofāgiem piemīt fagocitozes pazīmes.Zymosan un Pseudomonas aeruginosa, nespecifiska esterāzes aktivitāte, Fc receptori, oksidatīvā eksplozija, IL-1, TNF beta un IL-6 sekrēcija un replikatīvā atbilde uz eksogēniem augšanas faktoriem.Šūnas reaģē uz atbilstošiem mikrobu, daļiņu vai šķīstošu vielu stimuliem ar fagocitozi un nogalināšanu.NR8383 šūnas reaģē uz bleomicīnu, izdalot latentu transformējošu augšanas faktoru (TGF beta).Stimulācija ar bleomicīnu palielina arī TGF beta mRNS ekspresiju.Šīs šūnas ir jutīgas pret endotoksīnu.LPS līmenis no 1 līdz 10 ng/ml inhibē replikāciju par 50 %.LPS inhibīcija nav toksiska un ir atgriezeniska pat pēc līmeņa līdz 0,001 mg/ml ilgstoši.
Audums
Plaušas
Sinonīmi
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Makrofāgi

04Identifikatori

Atsauce
NR8383 (Cytion kataloga numurs 305200)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
Fc
Proteīnu ekspresija
Transformējošais augšanas faktors Beta (Tgf Beta), interleikīns 1 (Il-1), interleikīns 6 (Il-6)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 15% termiski inaktivētu FBS
Disociācijas reaģents
Accutase, tikai no pielipušajām šūnām, peldošās šūnas jāsavāc atsevišķi.
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Sprague Dawley
Donora vecums
Pieaugušo