Gå direkte til indholdet
NR8383
Væv
Lunge
Synonymer
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Dokumenter

NR8383

Cell line · Varenummer 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse
Cellerne blev dyrket i nærvær af konditioneret medium fra gerbil-lungeceller i ca. 8-9 måneder, hvorefter behovet for eksogene vækstfaktorer forsvandt. Cellerne udviser karakteristika som makrofagceller: fagocytose af zymosan og Pseudomonas aeruginosa, uspecifik esteraseaktivitet, Fc-receptorer, oxidativt burst, udskillelse af IL-1, TNF beta og IL-6 og replikativ respons på eksogene vækstfaktorer.Cellerne reagerer på passende mikrobielle, partikulære eller opløselige stimuli med fagocytose og drab.NR8383-celler reagerer på bleomycin ved at udskille latent transformerende vækstfaktor (TGF beta).Stimulering med bleomycin øger også TGF beta mRNA-ekspression.Disse celler er følsomme over for endotoksin.LPS-niveauer på 1 til 10 ng/mL hæmmer replikation med 50 %.LPS-hæmning er ikke-toksisk og reversibel selv efter niveauer på op til 0,001 mg/mL i længere perioder.
Væv
Lunge
Synonymer
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Klassificering

Organisme
Rotte
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Adhæsion og suspension
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Makrofag

04Identifikatorer

Kildehenvisning
NR8383 (Cytion katalognummer 305200)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Udtryk og modtagelighed

Udtrykte receptorer
Fc
Proteinekspression
Transforming Growth Factor Beta (Tgf Beta), Interleukin 1 (Il-1), Interleukin 6 (Il-6)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Supplér mediet med 15 % varmeinaktiveret FBS
Dissociationsreagens
Accutase, kun af de vedhæftede celler, flydende celler skal opsamles separat.
Oddyrkning
Saml de suspenderede celler i et 15 ml rør, og vask forsigtigt de klæbende celler med PBS uden calcium og magnesium (brug 3-5 ml til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber). Påfør Accutase (1-2 ml til T25-kolber, 2,5 ml til T75-kolber) for at sikre fuld dækning af cellelaget. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 10 minutter. Efter inkubationen kombineres og centrifugeres både suspensionen og de vedhæftede celler. Efter centrifugering resuspenderes cellepelleten forsigtigt, og cellesuspensionen overføres til nye kolber, der indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
Sprague Dawley
Donorens alder
Voksen