Przejdź do treści
NR8383
Chusteczka
Płuco
Synonimy
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Dokumenty

NR8383

Cell line · Numer produktu 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis
Komórki hodowano w obecności pożywki kondycjonowanej komórkami płuc myszoskoczka przez około 8 do 9 miesięcy, a następnie utracono zapotrzebowanie na egzogenne czynniki wzrostu. Komórki wykazują cechy komórek makrofagów: fagocytozę zymosanu i Pseudomonas aeruginosa, niespecyficzną aktywność esterazy, receptory Fc, wybuch oksydacyjny, wydzielanie IL-1, TNF beta i IL-6 oraz odpowiedź replikacyjną na egzogenne czynniki wzrostu.Komórki NR8383 reagują na bleomycynę poprzez wydzielanie utajonego transformującego czynnika wzrostu (TGF beta). Stymulacja bleomycyną zwiększa również ekspresję mRNA TGF beta. Komórki te są wrażliwe na endotoksynę. Poziomy LPS od 1 do 10 ng / ml hamują replikację o 50%. Hamowanie LPS jest nietoksyczne i odwracalne nawet po poziomach do 0,001 mg / ml przez dłuższy czas.
Chusteczka
Płuco
Synonimy
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Adhezja i zawiesina
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Makrofag

04Identyfikatory

Źródło
NR8383 (numer katalogowy Cytion 305200)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Ekspresja i podatność

Receptory ulegające ekspresji
Fc
Ekspresja białek
Transformujący czynnik wzrostu beta (Tgf Beta), interleukina 1 (Il-1), interleukina 6 (Il-6)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże o 15% FBS inaktywowanego termicznie
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase, tylko z komórek przylegających, komórki pływające muszą być zbierane oddzielnie.
Hodowla komórek w subkulturze
Zebrać komórki zawiesiny do probówki o pojemności 15 ml i delikatnie przemyć przylegające komórki PBS pozbawionym wapnia i magnezu (użyć 3-5 ml dla kolb T25 i 5-10 ml dla kolb T75). Nałożyć Accutase (1-2 ml na kolby T25, 2,5 ml na kolby T75), zapewniając pełne pokrycie warstwy komórek. Pozostawić komórki do inkubacji w temperaturze pokojowej przez 10 minut. Po inkubacji połączyć i odwirować zarówno zawiesinę, jak i przylegające komórki. Po odwirowaniu ostrożnie zawiesić osad komórek i przenieść zawiesinę komórek do nowych kolb zawierających świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Rasa / podgatunek
Sprague Dawley
Wiek dawcy
Dorosły