Μετάβαση στο περιεχόμενο
NR8383
Ιστός
Πνεύμονας
Συνώνυμα
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Έγγραφα

NR8383

Cell line · Αριθμός προϊόντος 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή
Τα κύτταρα καλλιεργήθηκαν παρουσία μέσου που είχε προετοιμαστεί από κύτταρα του πνεύμονα του gerbil για περίπου 8 έως 9 μήνες.Στη συνέχεια, η απαίτηση για εξωγενείς αυξητικούς παράγοντες χάθηκε.Τα κύτταρα παρουσιάζουν χαρακτηριστικά μακροφάγων κυττάρων.Φαγοκυττάρωση ζυμοσάνης και Pseudomonas aeruginosa, μη ειδική δραστηριότητα εστεράσης, υποδοχείς Fc, οξειδωτική έκρηξη, έκκριση IL-1, TNF beta και IL-6 και αναπαραγωγική απόκριση σε εξωγενείς αυξητικούς παράγοντες.Τα κύτταρα ανταποκρίνονται στα κατάλληλα μικροβιακά, σωματιδιακά ή διαλυτά ερεθίσματα με φαγοκυττάρωση και θανάτωση.Τα κύτταρα NR8383 ανταποκρίνονται στη λευκομυκίνη με έκκριση λανθάνοντος μετασχηματιστικού αυξητικού παράγοντα (TGF beta).Η διέγερση με λευκομυκίνη αυξάνει επίσης την έκφραση του mRNA του TGF beta.Τα κύτταρα αυτά είναι ευαίσθητα στην ενδοτοξίνη.Επίπεδα LPS από 1 έως 10 ng/mL αναστέλλουν τον πολλαπλασιασμό κατά 50%.Η αναστολή του LPS είναι μη τοξική και αναστρέψιμη ακόμη και μετά από επίπεδα έως 0,001mg/mL για παρατεταμένες περιόδους.
Ιστός
Πνεύμονας
Συνώνυμα
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Αρουραίος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Σε επαφή με την επιφάνεια και σε εναιώρημα
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Μακροφάγα

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
NR8383 (αριθμός καταλόγου Cytion 305200)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10116
Κελλοσαύρος
CVCL_4396

05Έκφραση και ευαισθησία

Υποδοχείς που εκφράζονται
Fc
Έκφραση πρωτεϊνών
Μετασχηματιστικός αυξητικός παράγοντας βήτα (Tgf Beta), ιντερλευκίνη 1 (Il-1), ιντερλευκίνη 6 (Il-6)

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το θρεπτικό μέσο με 15% FBS που έχει απενεργοποιηθεί με θερμότητα
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase, μόνο των προσκολλημένων κυττάρων, τα αιωρούμενα κύτταρα πρέπει να συλλέγονται χωριστά.
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Συγκεντρώστε τα εναιωρήματα σε ένα σωληνάριο των 15 ml και πλύνετε απαλά τα προσκολλημένα κύτταρα με PBS χωρίς ασβέστιο και μαγνήσιο (χρησιμοποιήστε 3-5 ml για φιάλες T25 και 5-10 ml για φιάλες T75). Εφαρμόστε Accutase (1-2 ml για φιάλες T25, 2,5 ml για φιάλες T75) εξασφαλίζοντας πλήρη κάλυψη της κυτταρικής στιβάδας. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 10 λεπτά. Μετά την επώαση, συνδυάστε και φυγοκεντρίστε τόσο το εναιώρημα όσο και τα προσκολλημένα κύτταρα. Μετά τη φυγοκέντρηση, ανασυγκεντρώστε προσεκτικά το κυτταρικό σφαιρίδιο και μεταφέρετε το εναιώρημα κυττάρων σε νέες φιάλες που περιέχουν φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
Sprague Dawley
Ηλικία δωρητή
Ενηλίκων