الانتقال إلى المحتوى
NR8383
الأنسجة
الرئة
المرادفات
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

المستندات

NR8383

Cell line · رقم المنتج 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف
تمت زراعة الخلايا في وجود وسط مكيف لخلايا رئة الجربوع لمدة 8 إلى 9 أشهر تقريباً، وبعد ذلك فُقدت الحاجة لعوامل النمو الخارجية، وتظهر الخلايا خصائص الخلايا البلعمية الكبيرة (macrophage cells)، حيث تقوم ببلعمة الزيموسان والزيموسان الزائفة الزنجارية ونشاط الاستريز غير المحدد، ومستقبلات Fc، والانفجار التأكسدي، وإفراز IL-1، و TNF بيتا و IL-6، والاستجابة التكاثرية لعوامل النمو الخارجية.تستجيب الخلايا للمحفزات الميكروبية أو الجزيئية أو الذائبة المناسبة عن طريق البلعمة والقتل، وتستجيب خلايا NR8383 إلى البليوميسين عن طريق إفراز عامل النمو التحويلي الكامن (TGF بيتا)، كما يزيد التحفيز بالبليوميسين من تعبير الحمض النووي الريبي المرسال TGF بيتا، وهذه الخلايا حساسة للسموم الداخلية، وتمنع مستويات LPS من 1 إلى 10 نانوغرام/ملل من التكاثر بنسبة 50%، كما أن تثبيط LPS غير سام وقابل للانعكاس حتى بعد مستويات تصل إلى 0.001 ملغ/ملل لفترات طويلة.
الأنسجة
الرئة
المرادفات
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02التصنيف

كائن حي
الجرذ
الجنس
ذكر
خصائص النمو
التثبيت والتعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
البلاعم

04المعرّفات

المرجع
NR8383 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 305200)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10116
سيلوصور
CVCL_4396

05التعبير والقابلية للإصابة

المستقبلات المُعبَّر عنها
Fc
التعبير البروتيني
عامل النمو المتحول بيتا (Tgf Beta)، إنترلوكين 1 (Il-1)، إنترلوكين 6 (Il-6)

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
دعم الوسط ب 15٪ من FBS المعطل بالحرارة
كاشف التفكك
أكوتاز، فقط من الخلايا الملتصقة، يجب جمع الخلايا العائمة بشكل منفصل.
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
سبرج داولي
عمر المتبرع
للبالغين