Preskoči na vsebino
NR8383
Tkivo
Pljuča
Sinonimi
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Dokumenti

NR8383

Cell line · Številka izdelka 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis
Celice so gojili v prisotnosti pogojnega gojišča iz pljučnih celic gerbilov približno 8 do 9 mesecev.Nato so izgubile potrebo po eksogenih rastnih dejavnikih.Celice imajo značilnosti makrofagnih celic.Fagocitoza zimosana in Pseudomonas aeruginosa, nespecifična esterazna aktivnost, Fc receptorji, oksidativni izbruh, izločanje IL-1, TNF beta in IL-6 ter replikativni odziv na eksogene rastne dejavnike.Celice se na ustrezne mikrobne, trdne ali topne dražljaje odzivajo s fagocitozo in ubijanjem.Celice NR8383 se na bleomicin odzovejo z izločanjem latentnega transformativnega rastnega faktorja (TGF beta).Stimulacija z bleomicinom poveča tudi izražanje mRNA TGF beta.Te celice so občutljive na endotoksin.Ravni LPS od 1 do 10 ng/ml zavirajo replikacijo za 50 %.Zaviranje LPS ni toksično in je reverzibilno tudi po vrednostih do 0,001 mg/ml za daljše obdobje.
Tkivo
Pljuča
Sinonimi
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Razvrstitev

Organizem
Podgana
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Adhezivni in suspenzijski
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Makrofagi

04Identifikatorji

Navajanje vira
NR8383 (kataloška številka Cytion 305200)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Izražanje in dovzetnost

Izraženi receptorji
Fc
Ekspresija beljakovin
Transformatorski rastni faktor beta (Tgf Beta), interlevkin 1 (Il-1), interlevkin 6 (Il-6)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite s 15 % toplotno aktiviranega FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase, samo adherentne celice, plavajoče celice je treba zbirati ločeno.
Preusmeritev v drugo kulturo
V 15 ml epruveti zberite suspenzijske celice in jih nežno sperite s PBS brez kalcija in magnezija (uporabite 3-5 ml za bučke T25 in 5-10 ml za bučke T75). Uporabite Accutase (1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75), tako da popolnoma prekrijete plast celic. Počakajte, da se celice inkubirajo pri sobni temperaturi 10 minut. Po inkubaciji združite in centrifugirajte suspenzijo in adherentne celice. Po centrifugiranju previdno ponovno suspendirajte celično peleto in celično suspenzijo prenesite v nove bučke s svežim gojiščem.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
Sprague Dawley
Starost darovalca
Odrasli