Prejsť na obsah
NR8383
Tkanivo
Pľúca
Synonymá
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Dokumenty

NR8383

Cell line · Číslo výrobku 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis
Bunky boli kultivované v prítomnosti kondicionovaného média s pľúcnymi bunkami gerbilov približne 8 až 9 mesiacov.Následne sa stratila požiadavka na exogénne rastové faktory.Bunky vykazujú vlastnosti makrofágových buniek.Fagocytóza zymosanu a Pseudomonas aeruginosa, nešpecifická esterázová aktivita, Fc receptory, oxidačný výbuch, sekrécia IL-1, TNF beta a IL-6 a replikačná odpoveď na exogénne rastové faktory.Bunky reagujú na vhodné mikrobiálne, časticové alebo rozpustné podnety fagocytózou a usmrcovaním. bunky NR8383 reagujú na bleomycín vylučovaním latentného transformačného rastového faktora (TGF beta). stimulácia bleomycínom tiež zvyšuje expresiu mRNA TGF beta. tieto bunky sú citlivé na endotoxín. hladiny LPS 1 až 10 ng/ml inhibujú replikáciu o 50 %. inhibícia LPS je netoxická a reverzibilná aj po hladinách do 0,001 mg/ml počas dlhšieho obdobia.
Tkanivo
Pľúca
Synonymá
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Klasifikácia

Organizmus
Potkan
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Adhézia a suspenzia
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Makrofágy

04Identifikátory

Citácia
NR8383 (katalógové číslo Cytion 305200)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Prejav a náchylnosť

Exprimované receptory
Fc
Expresia proteínov
Transformujúci rastový faktor beta (Tgf Beta), interleukín 1 (Il-1), interleukín 6 (Il-6)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 15 % tepelne inaktivovaného FBS
Disociačné činidlo
Akutáza, len z priľnutých buniek, plávajúce bunky sa musia zbierať oddelene.
Rozmnožovanie kultúr
Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
Sprague Dawley
Vek darcu
Dospelí