İçeriğe atla
NR8383
Doku
Akciğer
Eş anlamlılar
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Belgeler

NR8383

Cell line · Ürün numarası 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama
Hücreler yaklaşık 8 ila 9 ay boyunca gerbil akciğer hücresi koşullandırılmış besiyeri varlığında kültürlenmiş ve daha sonra eksojen büyüme faktörlerine olan gereksinim kaybolmuştur. Hücreler makrofaj hücrelerinin özelliklerini sergilemektedir: Zymosan ve Pseudomonas aeruginosa'nın fagositozu, spesifik olmayan esteraz aktivitesi, Fc reseptörleri, oksidatif patlama, IL-1, TNF beta ve IL-6 salgılanması ve eksojen büyüme faktörlerine replikatif yanıt.Hücreler uygun mikrobik, partiküllü veya çözünür uyaranlara fagositoz ve öldürme ile yanıt verir.NR8383 hücreleri bleomisine gizli dönüştürücü büyüme faktörü (TGF beta) salgılayarak yanıt verir.Bleomisin ile uyarılma ayrıca TGF beta mRNA ekspresyonunu artırır.Bu hücreler endotoksine duyarlıdır.1 ila 10 ng / mL LPS seviyeleri replikasyonu% 50 oranında inhibe eder.LPS inhibisyonu, uzun süre 0.001 mg / mL'ye kadar olan seviyelerden sonra bile toksik değildir ve geri dönüşümlüdür.
Doku
Akciğer
Eş anlamlılar
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Sınıflandırma

Canlı
Sıçan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Yapışkan ve süspansiyon
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Makrofaj

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NR8383 (Cytion katalog numarası 305200)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05İfade ve duyarlılık

Eksprese edilen reseptörler
Fc
Protein ekspresyonu
Transforming Growth Factor Beta (Tgf Beta), Interleukin 1 (Il-1), Interleukin 6 (Il-6)

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %15 ısıyla inaktive edilmiş FBS ile destekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase, yalnızca yapışık hücrelerin, yüzen hücrelerin ayrı olarak toplanması gerekir.
Alt kültür oluşturma
Süspansiyon hücrelerini 15 ml'lik bir tüpte toplayın ve yapışık hücreleri kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile nazikçe yıkayın (T25 şişeleri için 3-5 ml ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın). Accutase uygulayın (T25 şişeler için 1-2 ml, T75 şişeler için 2,5 ml) ve hücre tabakasının tamamen kaplandığından emin olun. Hücreleri 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübasyona bırakın. İnkübasyonun ardından, hem süspansiyonu hem de yapışık hücreleri birleştirin ve santrifüjleyin. Santrifüjden sonra hücre peletini dikkatlice yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunu taze ortam içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
Sprague Dawley
Bağışçının yaşı
Yetişkin