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NR8383
Pañuelo de papel
Pulmón
Sinónimos
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

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NR8383

Cell line · Número de producto 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

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01Información general

Descripción
Las células se cultivaron en presencia de medio condicionado de células de pulmón de jerbo durante aproximadamente 8 a 9 meses. Posteriormente, se perdió la necesidad de factores de crecimiento exógenos. Las células presentan características de células macrófagas: fagocitosis de zimosán y Pseudomonas aeruginosa, actividad de esterasa inespecífica, receptores Fc, explosión oxidativa, secreción de IL-1, TNF beta e IL-6, y respuesta replicativa a factores de crecimiento exógenos.Las células responden a estímulos microbianos, particulados o solubles apropiados con fagocitosis y muerte.Las células NR8383 responden a la bleomicina secretando factor de crecimiento transformante latente(TGF beta).La estimulación con bleomicina también aumenta la expresión de ARNm de TGF beta.Estas células son sensibles a la endotoxina.Niveles de LPS de 1 a 10 ng/mL inhiben la replicación en un 50%.La inhibición por LPS no es tóxica y es reversible incluso tras niveles de hasta 0,001mg/mL durante periodos prolongados.
Pañuelo de papel
Pulmón
Sinónimos
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Clasificación

Organismo
Rata
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente y en suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Macrófagos

04Identificadores

Referencia
NR8383 (número de catálogo 305200 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Expresión y susceptibilidad

Receptores expresados
Fc
Expresión de proteínas
Factor de crecimiento transformante Beta(Tgf Beta), Interleucina 1(Il-1), Interleucina 6(Il-6)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
RPMI 1640, con: 2,0 mM de glutamina estable, con: 2,0 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820700a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 15% de FBS inactivado por calor
Reactivo de disociación
Accutase, sólo de las células adherentes, las células flotantes deben recogerse por separado.
Subcultivo
Reunir las células en suspensión en un tubo de 15 ml y lavar suavemente las células adherentes con PBS sin calcio ni magnesio (utilizar 3-5 ml para matraces T25 y 5-10 ml para matraces T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para matraces T25, 2,5 ml para matraces T75) asegurando la cobertura completa de la capa celular. Dejar incubar las células a temperatura ambiente durante 10 minutos. Tras la incubación, combinar y centrifugar tanto la suspensión como las células adherentes. Tras la centrifugación, resuspender cuidadosamente el sedimento celular y transferir la suspensión celular a nuevos matraces que contengan medio fresco.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
Sprague Dawley
Edad del donante
Adultos