Siirry sisältöön
NR8383
Kudos
Keuhkot
Synonyymit
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Asiakirjat

NR8383

Cell line · Tuotenumero 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus
Soluja kasvatettiin gerbiilin keuhkosolujen ehdollistetun väliaineen läsnäollessa noin 8-9 kuukauden ajan.Tämän jälkeen eksogeenisten kasvutekijöiden tarve hävisi.Soluilla on makrofagisolujen ominaisuuksia: zymosaanin ja Pseudomonas aeruginosan fagosytointi, epäspesifinen esteraasiaktiivisuus, Fc-reseptorit, oksidatiivinen purkaus, IL-1:n, TNF-beta:n ja IL-6:n eritys sekä replikatiivinen vaste eksogeenisille kasvutekijöille.Solut reagoivat sopiviin mikrobiperäisiin, partikkelimaisiin tai liukoisiin ärsykkeisiin fagosytoosilla ja tappamisella.NR8383-solut reagoivat bleomysiiniin erittämällä piilevää transformoivaa kasvutekijää (TGF beeta).Bleomysiinillä stimulointi lisää myös TGF beeta -mRNA:n ilmentymistä.Nämä solut ovat herkkiä endotoksiinille.LPS-tasot, jotka ovat 1-10 ng/mL, estävät replikaation 50 %:lla.LPS:n inhibitio ei ole myrkyllinen eikä se ole palautuva, vaikka se olisi ollut jopa 0,001 mg/mL:n pitoisuuksissa pitkiä aikoja.
Kudos
Keuhkot
Synonyymit
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Luokittelu

Organismi
Rotta
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Makrofagit

04Tunnisteet

Lähdeviite
NR8383 (Cytionin luettelonumero 305200)
NCBI-verotunnus
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Ilmentyminen ja alttius

Ilmentyvät reseptorit
Fc
Proteiinin ilmentyminen
Transformoiva kasvutekijä beeta (Tgf Beta), interleukiini 1 (Il-1), interleukiini 6 (Il-6)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 15 % lämpöinaktivoidulla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase, vain tarttuvat solut, kelluvat solut on kerättävä erikseen.
Soluviljely
Kerää suspensiosolut 15 ml:n putkeen ja pese kiinni olevat solut varovasti PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia (3-5 ml T25-pulloissa ja 5-10 ml T75-pulloissa). Levitä Accutasea (1-2 ml T25-pulloihin, 2,5 ml T75-pulloihin) varmistaen, että solukerros peittyy kokonaan. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 10 minuuttia. Inkuboinnin jälkeen yhdistetään ja sentrifugoidaan sekä suspensio että adherentit solut. Sentrifugoinnin jälkeen solupelletti suspendoidaan varovasti uudelleen ja siirretään solususpensio uusiin pulloihin, jotka sisältävät tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Rotua / alalajia
Sprague Dawley
Luovuttajan ikä
Aikuiset