Skip to content
NR8383
Tissue
ปอด
Synonyms
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Documents

NR8383

Cell line · Product number 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
เซลล์ถูกเพาะเลี้ยงในสภาวะที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์จากเซลล์ปอดของหนูเจอร์บิลเป็นระยะเวลาประมาณ 8 ถึง 9 เดือน หลังจากนั้นจึงไม่จำเป็นต้องใช้ปัจจัยการเจริญเติบโตจากภายนอกอีกต่อไปเซลล์แสดงลักษณะของเซลล์แมคโครฟาจ การฟาโกไซโทซิสของไซโมซานและ Pseudomonas aeruginosa, กิจกรรมเอสเทอเรสที่ไม่จำเพาะเจาะจง, ตัวรับ Fc, การระเบิดออกซิเดทีฟ, การหลั่ง IL-1, TNF beta และ IL-6, และการตอบสนองการจำลองแบบต่อปัจจัยการเจริญเติบโตจากภายนอก เซลล์ตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นที่เหมาะสมจากจุลินทรีย์, อนุภาค หรือสารละลายด้วยกระบวนการฟาโกไซโทซิสและการฆ่าเซลล์ NR8383 ตอบสนองต่อเบลโอมัยซินโดยการหลั่งตัวแปลงการเจริญเติบโตที่แฝงอยู่ (TGF beta) การกระตุ้นด้วยเบลโอมัยซินยังเพิ่มการแสดงออกของ mRNA ของ TGF beta เซลล์เหล่านี้ไวต่อเอนโดทอกซิน ระดับ LPS 1 ถึง 10 นาโนกรัม/มิลลิลิตร จะยับยั้งการจำลองแบบ 50% การยับยั้งโดย LPS ไม่เป็นพิษและสามารถกลับคืนได้แม้หลังจากระดับสูงถึง 0.001 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร เป็นระยะเวลานาน
Tissue
ปอด
Synonyms
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Classification

Organism
Rat
Sex
Male
Growth properties
Adherent and suspension
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
มาโครฟาจ

04Identifiers

Citation
NR8383 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305200)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Expression and susceptibility

Receptors expressed
เอฟซี
Protein expression
ตัวกระตุ้นการเจริญเติบโตเบต้า (Tgf Beta), อินเตอร์ลิวคิน 1 (Il-1), อินเตอร์ลิวคิน 6 (Il-6)

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS ที่ทำให้ไม่มีความสามารถในการติดเชื้อด้วยความร้อน 15%
Dissociation reagent
Accutase เฉพาะเซลล์ที่เกาะติดเท่านั้น เซลล์ที่ลอยต้องเก็บแยกต่างหาก
Subculturing
รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
สเปร็ก ดอว์ลีย์
Donor age
ผู้ใหญ่