Zum Inhalt springen
NR8383
Gewebe
Lunge
Synonyme
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Dokumente

NR8383

Cell line · Artikelnummer 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00zzgl. MwSt. und Versandkosten

Anpassung / Empfehlungen

Auf Lager
Charge
Empfohlen (frischeste Charge)
  • CoA
1

01Allgemeine Informationen

Beschreibung
Die Zellen wurden etwa 8 bis 9 Monate lang in Gegenwart von konditioniertem Gerbil-Lungenzellenmedium kultiviert, woraufhin der Bedarf an exogenen Wachstumsfaktoren entfiel. Die Zellen weisen Merkmale von Makrophagenzellen auf: Phagozytose von Zymosan und Pseudomonas aeruginosa, unspezifische Esteraseaktivität, Fc-Rezeptoren, oxidativer Burst, Sekretion von IL-1, TNF beta und IL-6 sowie replikative Reaktion auf exogene Wachstumsfaktoren.Die Zellen reagieren auf geeignete mikrobielle, partikuläre oder lösliche Stimuli mit Phagozytose und Abtötung.NR8383-Zellen reagieren auf Bleomycin mit der Sekretion von latentem transformierendem Wachstumsfaktor (TGF beta).Die Stimulation mit Bleomycin erhöht auch die TGF beta mRNA-Expression.Diese Zellen reagieren empfindlich auf Endotoxin.LPS-Konzentrationen von 1 bis 10 ng/mL hemmen die Replikation um 50 %.Die LPS-Hemmung ist ungiftig und selbst bei Konzentrationen von bis zu 0,001 mg/mL über längere Zeiträume reversibel.
Gewebe
Lunge
Synonyme
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Klassifizierung

Organismus
Ratte
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Adhärente und Suspension
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Makrophagen

04Bezeichner

Quellenangabe
NR8383 (Cytion-Katalognummer 305200)
NCBI-Steuer-ID
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Fc
Proteinexpression
Transformierender Wachstumsfaktor Beta (Tgf Beta), Interleukin 1 (Il-1), Interleukin 6 (Il-6)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 15% hitzeinaktiviertem FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase, nur der anhaftenden Zellen, schwimmende Zellen müssen separat gesammelt werden.
Subkultivierung
Die Suspensionszellen in einem 15-ml-Röhrchen sammeln und die anhaftenden Zellen vorsichtig mit PBS ohne Kalzium und Magnesium waschen (3-5 ml für T25-Kolben und 5-10 ml für T75-Kolben verwenden). Accutase auftragen (1-2 ml für T25-Kolben, 2,5 ml für T75-Kolben), um sicherzustellen, dass die Zellschicht vollständig bedeckt ist. Die Zellen 10 Minuten lang bei Raumtemperatur inkubieren lassen. Nach der Inkubation sowohl die Suspension als auch die adhärenten Zellen mischen und zentrifugieren. Nach der Zentrifugation das Zellpellet vorsichtig resuspendieren und die Zellsuspension in neue Flaschen mit frischem Medium überführen.
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Rasse / Unterart
Sprague Dawley
Alter des Spenders
Erwachsener