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NR8383
Tecido
Pulmão
Sinónimos
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Documentos

NR8383

Cell line · Número do produto 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

Em stock
Lote
Recomendado (lote mais recente)
  • CoA
1

01Informações gerais

Descrição
As células foram cultivadas na presença de um meio condicionado de células de pulmão de gerbo durante cerca de 8 a 9 meses, perdendo-se assim a necessidade de factores de crescimento exógenos. As células apresentam caraterísticas de células macrofágicas: fagocitose de zymosan e Pseudomonas aeruginosa, atividade de esterase inespecífica, receptores Fc, explosão oxidativa, secreção de IL-1, TNF beta e IL-6 e resposta replicativa a factores de crescimento exógenos.As células NR8383 respondem a estímulos microbianos, particulados ou solúveis apropriados com fagocitose e morte.As células NR8383 respondem à bleomicina através da secreção do fator de crescimento transformador latente (TGF beta).A estimulação com bleomicina também aumenta a expressão do ARNm do TGF beta.Estas células são sensíveis à endotoxina.Níveis de LPS de 1 a 10 ng/mL inibem a replicação em 50%.A inibição do LPS não é tóxica e é reversível mesmo após níveis até 0,001mg/mL durante períodos prolongados.
Tecido
Pulmão
Sinónimos
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Adesão e suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Macrófago

04Identificadores

Referência
NR8383 (número de catálogo Cytion 305200)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Expressão e suscetibilidade

Receptores expressos
Fc
Expressão proteica
Fator de crescimento transformador Beta (Tgf Beta), Interleucina 1 (Il-1), Interleucina 6 (Il-6)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 15% de FBS inactivado pelo calor
Reagente de dissociação
Accutase, apenas das células aderentes, as células flutuantes devem ser recolhidas separadamente.
Subcultura
Reunir as células em suspensão num tubo de 15 ml e lavar suavemente as células aderentes com PBS sem cálcio e magnésio (utilizar 3-5 ml para os frascos T25 e 5-10 ml para os frascos T75). Aplicar Accutase (1-2 ml para os frascos T25, 2,5 ml para os frascos T75), assegurando a cobertura total da camada celular. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 10 minutos. Após a incubação, combinar e centrifugar tanto a suspensão como as células aderentes. Após a centrifugação, ressuspender cuidadosamente o pellet de células e transferir a suspensão de células para novos frascos com meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Raça / subespécie
Sprague Dawley
Idade do dador
Adulto