Mine otse sisu juurde
NR8383
Kude
Kopsud
Sünonüümid
NR-8383, NR 8383, NR8383.1, NR8383 clone AgCl1x3A, AgC11x3A, Normal Rat, August 3, 1983

Dokumendid

NR8383

Cell line · Toote number 305200

The cells were cultured in the presence of gerbil lung cell conditioned medium for approximately 8 to 9 months.Subsequently the requirement for exogenous gro...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus
Rakke kasvatati gerberi kopsurakkude konditsioneeritud keskkonnas ligikaudu 8-9 kuud.Seejärel kaotati vajadus eksogeensete kasvufaktorite järele.Rakkudel on makrofaagirakkude omadused.Zümosaani ja Pseudomonas aeruginosa fagotsütoos, mittespetsiifiline esteraasi aktiivsus, Fc retseptorid, oksüdatiivne pursk, IL-1, TNF beeta ja IL-6 sekretsioon ning replikatiivne vastus eksogeensetele kasvufaktoritele.Rakud reageerivad sobivatele mikroobsetele, tahkete või lahustuvate stiimulitele fagotsütoosi ja tapmisega.NR8383 rakud reageerivad bleomütsiinile latentse transformeeriva kasvufaktori (TGF beeta) sekretsiooniga.Bleomütsiini stimuleerimine suurendab ka TGF beeta mRNA ekspressiooni.Need rakud on tundlikud endotoksiini suhtes.LPS tasemed 1 kuni 10 ng/ml inhibeerivad replikatsiooni 50% võrra.LPS inhibeerimine on mittetoksiline ja pöörduv isegi pärast tasemeid kuni 0,001mg/ml pikema aja jooksul.
Kude
Kopsud
Sünonüümid
  • NR-8383
  • NR 8383
  • NR8383.1
  • NR8383 clone AgCl1x3A
  • AgC11x3A
  • Normal Rat
  • August 3
  • 1983

02Klassifikatsioon

Organism
Rott
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Makrofaagid

04Tunnused

Viide
NR8383 (Cytioni katalooginumber 305200)
NCBI maksukood
10116
Cellosaurus
CVCL_4396

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Fc
Valgu ekspressioon
Transformeeriv kasvufaktor beeta (Tgf beeta), interleukiin 1 (Il-1), interleukiin 6 (Il-6)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendatakse keskkonda 15% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase, ainult kleepuvatest rakkudest, ujuvad rakud tuleb koguda eraldi.
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Sprague Dawley
Doonori vanus
Täiskasvanud