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SUM159PT
Tessuto
Seno
Malattia
Carcinoma pleomorfo della mammella
Sinonimi
SUM-159-PT, SUM-159PT, SUM 159PT, SUM-159, SUM 159, SUM159, 159 PT, 159PT

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SUM159PT

Cell line · Codice prodotto 305116

The SUM159PT cell line is derived from an anaplastic carcinoma of the breast and is a model for triple-negative breast cancer (TNBC), a subtype lacking es...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare SUM159PT deriva da un carcinoma anaplastico della mammella ed è un modello di carcinoma mammario triplo-negativo (TNBC), un sottotipo privo di recettori per gli estrogeni (ER), per il progesterone (PR) e di espressione di HER2. SUM159PT è caratterizzato da un fenotipo aggressivo, da una crescita indipendente dall'ancoraggio e da un potenziale invasivo che lo rendono particolarmente prezioso per lo studio della biologia e della terapia del TNBC.

L'analisi genetica di SUM159PT ha rivelato notevoli amplificazioni e delezioni comuni nei tumori al seno aggressivi. Queste includono amplificazioni a loci cromosomici come l'8q (contenente MYC) e perdite all'8p, che sono implicate nella progressione del tumore. La linea è aneuploide, come molte linee cellulari tumorali, e presenta alterazioni in vie critiche per la proliferazione e l'apoptosi. SUM159PT presenta anche caratteristiche basali ed esprime le citocheratine 5/6 e 14, marcatori associati ai tumori al seno di tipo basale. Queste caratteristiche ne rafforzano l'utilità nella modellazione di TNBC di tipo basale e nell'esplorazione di nuovi approcci terapeutici.

Studi di sensibilità su SUM159PT hanno evidenziato la sua risposta agli inibitori della bromodomina BET, come JQ1, che hanno come bersaglio regolatori epigenetici come BRD4. Il trattamento con JQ1 induce cambiamenti morfologici significativi, tra cui la senescenza e la differenziazione da basale a luminale, inibendo la proliferazione e promuovendo l'apoptosi. Questi effetti sottolineano il ruolo del controllo trascrizionale nella sopravvivenza del TNBC e suggeriscono un potenziale per terapie combinate mirate ai regolatori epigenetici nei sottotipi di TNBC resistenti. Questa linea cellulare è ampiamente utilizzata sia in saggi in vitro che in modelli di xenotrapianto in vivo per valutare l'efficacia di nuovi trattamenti.

Tessuto
Seno
Malattia
Carcinoma pleomorfo della mammella
Sinonimi
  • SUM-159-PT
  • SUM-159PT
  • SUM 159PT
  • SUM-159
  • SUM 159
  • SUM159
  • 159 PT
  • 159PT

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
SUM159PT (numero di catalogo Cytion 305116)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_5423

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
Ham's F12, w: 1,0 mM di glutammina stabile, w: 1,0 mM di piruvato di sodio, w: 1,1 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820600a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Aggiungere al terreno di coltura il 10% di FBS, 1 µg/ml di idrocortisone e 5 µg/ml di insulina
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
71 anni