Pereiti prie turinio
6T-CEM
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
T ląstelių ūminė limfoblastinė leukemija
Sinonimai
6-T CEM

Dokumentai

6T-CEM

Cell line · Prekės numeris 305132

6T-CEM ląstelių linija yra žmogaus ūminės limfoblastinės leukemijos (ALL) T ląstelių linijos CCRF-CEM mutacinė atmaina. Ji buvo sukurta veikiant pirminę ...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

6T-CEM ląstelių linija yra mutavusi žmogaus ūminės limfoblastinės leukemijos (ŪLL) T ląstelių linijos CCRF-CEM darinys. Ji buvo sukurta veikiant pirmines CEM ląsteles 6-tioguaninu, todėl buvo atrinkta sublinija, pasižyminti atsparumu šiam junginiui. Šis atsparumas atsirado dėl HPRT geno, kuris yra labai svarbus purinų gelbėjimo kelyje, inaktyvavimo. 6T-CEM ląstelės buvo ypač vertingos tiriant atsparumo vaistams mechanizmus, ypač susijusius su purino analogais, tokiais kaip 6-tioguaninas. Be to, šios ląstelės pasižymi unikalaus T ląstelių slopinimo indukcinio faktoriaus (SIF) sekrecija, kuris ne tik nėra mitogeniškas ir citotoksiškas, bet ir gali slopinti T ląstelių proliferaciją, o B ląstelių proliferaciją tam tikrais praskiedimais sumažinti.

6T-CEM ląstelės ir jų subklonai, pavyzdžiui, 6T-CEM-20, pasižymėjo gerokai padidėjusia šio slopinančio indukuojančio faktoriaus gamyba, kuris gali būti naudojamas imunologiniuose tyrimuose, ypač tiriant T ląstelių reguliavimą ir imuninės sistemos slopinimą. Nustatyta, kad šių ląstelių išskiriamas SIF slopina iki 90 % mitogeno sukeltos T ląstelių proliferacijos, esant itin dideliems praskiedimams (iki 10^-9), todėl šios ląstelės yra veiksmingas modelis terapinėms strategijoms, susijusioms su imuninio atsako moduliavimu, tirti. Naudojant šias ląsteles įvairiose eksperimentinėse sistemose, pavyko išsiaiškinti imuninės sistemos slopinimo molekulinius pagrindus, o tai gali turėti reikšmės kuriant autoimuninių ligų gydymo būdus ir organų transplantacijos kontekste, siekiant išvengti transplantato atmetimo.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
T ląstelių ūminė limfoblastinė leukemija
Sinonimai
  • 6-T CEM

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Pakaba
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Limfoblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
6T-CEM (Cytion katalogo numeris 305132)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_6869

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Alfa MEM, w: 2,0 mM stabilus glutaminas, w/o: Ribonukleozidai, w/o: Deoksiribonukleozidai, w: 1,0 mM natrio piruvatas, w: 2,2 g/l NaHCO3
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Subkultūrinis auginimas
Švelniai homogenizuokite kolboje esantį ląstelių suspensiją, pipetuodami aukštyn ir žemyn, tada paimkite reprezentatyvią mėginį, kad nustatytumėte ląstelių tankį ml. Praskieskite suspensiją, kad pasiektumėte 1 x 105 ląstelių/ml koncentraciją šviežia kultūrinė terpė, ir padalinkite pakoreguotą suspensiją į naujas kolbas tolesniam auginimui.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Donoro amžius
4 metai
Etninė priklausomybė
Azijos