6T-CEM

A linhagem celular 6T-CEM é um derivado mutante da linhagem de células T CCRF-CEM, proveniente da leucemia linfoblástica aguda (LLA) humana. Ela foi desenvolvida por meio da exposição das células CEM originais à 6-tioguanina, o que levou à seleção de uma sublinhagem que apresenta resistência a esse composto. Essa resistência é resultado da inativação do gene HPRT, que é fundamental na via de resgate de purinas. As células 6T-CEM têm se mostrado particularmente valiosas no estudo de mecanismos de resistência a medicamentos, especialmente no que diz respeito a análogos de purinas, como a 6-tioguanina. Além disso, essas células são caracterizadas pela secreção de um fator indutor supressor de células T (SIF) exclusivo, que não só é não mitogênico e não citotóxico, mas também capaz de suprimir a proliferação de células T, poupando a proliferação de células B em determinadas diluições.

As células 6T-CEM e seus subclones, como o 6T-CEM-20, demonstraram um aumento significativo na produção desse fator indutor supressor, que possui aplicações potenciais na pesquisa imunológica, particularmente no estudo da regulação das células T e da supressão imunológica. Demonstrou-se que o SIF secretado por essas células suprime até 90% da proliferação de células T induzida por mitógenos em diluições extremamente altas (até 10^-9), tornando essas células um modelo potente para a exploração de estratégias terapêuticas que envolvam a modulação da resposta imunológica. O uso dessas células em diversos arranjos experimentais proporcionou insights sobre os fundamentos moleculares da supressão imunológica, com implicações potenciais para o desenvolvimento de tratamentos para doenças autoimunes e no contexto do transplante de órgãos, para prevenir a rejeição do enxerto.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.