Gå til innholdet
6T-CEM
Vev
Perifert blod
Sykdom
T-celle akutt lymfoblastisk leukemi
Synonymer
6-T CEM

Dokumenter

6T-CEM

Cell line · Produktnummer 305132

6T-CEM-cellelinjen er en mutant avledning av den humane T-cellelinjen CCRF-CEM, som stammer fra akutt lymfoblastisk leukemi (ALL). Den ble utviklet ved å utsette stamcellen ...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

6T-CEM-cellelinjen er et mutert derivat av den humane T-cellelinjen CCRF-CEM for akutt lymfoblastisk leukemi (ALL). Den ble utviklet ved å eksponere de opprinnelige CEM-cellene for 6-tioguanin, noe som førte til seleksjon av en sublinje som utviser resistens mot denne forbindelsen. Denne resistensen skyldes inaktivering av HPRT-genet, som er kritisk i purinreserveringsveien. 6T-CEM-cellene har vært spesielt verdifulle i studier av resistensmekanismer, særlig når det gjelder purinanaloger som 6-thioguanin. I tillegg kjennetegnes disse cellene ved at de skiller ut en unik T-celle-suppressorinduktorfaktor (SIF), som ikke bare er ikke-mitogen og ikke-cytotoksisk, men som også er i stand til å undertrykke T-celleproliferasjon og samtidig skåne B-celleproliferasjon ved visse fortynninger.

6T-CEM-celler og deres subkloner, som 6T-CEM-20, har vist en betydelig økning i produksjonen av denne suppressor-induktorfaktoren, som har potensielle bruksområder i immunologisk forskning, særlig i studier av T-celleregulering og immunsuppresjon. SIF som skilles ut av disse cellene, har vist seg å undertrykke opptil 90 % av mitogenindusert T-celleproliferasjon ved ekstremt høye fortynninger (opptil 10^-9), noe som gjør disse cellene til en potent modell for utforskning av terapeutiske strategier som innebærer modulering av immunresponsen. Bruken av disse cellene i ulike eksperimentelle oppsett har gitt innsikt i de molekylære forutsetningene for immunsuppresjon, med potensielle implikasjoner for utviklingen av behandlinger for autoimmune sykdommer og i forbindelse med organtransplantasjon for å forhindre avstøtning av transplantatet.

Vev
Perifert blod
Sykdom
T-celle akutt lymfoblastisk leukemi
Synonymer
  • 6-T CEM

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Oppheng
Biosikkerhetsnivå
2

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
6T-CEM (Cytion-katalognummer 305132)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6869

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
Alpha MEM, m: 2,0 mM stabilt glutamin, uten: Ribonukleosider, m/o: Deoksyribonukleosider, m: 1,0 mM Natriumpyruvat, m: 2,2 g/L NaHCO3
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Subkultivering
Homogeniser cellesuspensjonen i kolben forsiktig ved å pipettere opp og ned, og ta deretter en representativ prøve for å bestemme celletettheten per ml. Fortynn suspensjonen til en cellekonsentrasjon på 1 x 105 celler/ml med ferskt dyrkningsmedium, og fordel den justerte suspensjonen i nye kolber for videre dyrking.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

07Donor

Donorens alder
4 år
Etnisitet
Asiatisk