Gå direkte til indholdet
6T-CEM
Væv
Perifert blod
Sygdom
T-celle akut lymfoblastisk leukæmi
Synonymer
6-T CEM

Dokumenter

6T-CEM

Cell line · Varenummer 305132

6T-CEM-cellelinjen er en mutantafledning af den humane T-cellelinje CCRF-CEM fra akut lymfoblastisk leukæmi (ALL). Den blev udviklet ved at udsætte stamcellen ...

€430.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

6T-CEM-cellelinjen er et muteret derivat af den humane akutte lymfoblastiske leukæmi (ALL) T-cellelinje CCRF-CEM. Den blev udviklet ved at udsætte de oprindelige CEM-celler for 6-thioguanin, hvilket førte til udvælgelsen af en sublinje, der udviser resistens over for denne forbindelse. Denne resistens er et resultat af inaktiveringen af HPRT-genet, som er kritisk i purin-bjergningsvejen. 6T-CEM-cellerne har været særligt værdifulde i studiet af resistensmekanismer, især i forbindelse med purinanaloger som 6-thioguanin. Derudover er disse celler karakteriseret ved deres udskillelse af en unik T-celle-suppressor-induktionsfaktor (SIF), som ikke kun er ikke-mitogen og ikke-cytotoksisk, men også i stand til at undertrykke T-celleproliferation og samtidig skåne B-celleproliferation ved visse fortyndinger.

6T-CEM-celler og deres subkloner, som 6T-CEM-20, har vist en betydelig stigning i produktionen af denne suppressor-inducer-faktor, som har potentielle anvendelser i immunologisk forskning, især i studiet af T-celleregulering og immunsuppression. Den SIF, der udskilles af disse celler, har vist sig at undertrykke op til 90 % af mitogeninduceret T-celleproliferation ved ekstremt høje fortyndinger (op til 10^-9), hvilket gør disse celler til en potent model til udforskning af terapeutiske strategier, der involverer modulering af immunresponsen. Brugen af disse celler i forskellige forsøgsopstillinger har givet indsigt i det molekylære grundlag for immunundertrykkelse med potentielle konsekvenser for udviklingen af behandlinger for autoimmune sygdomme og i forbindelse med organtransplantation for at forhindre afstødning af transplantater.

Væv
Perifert blod
Sygdom
T-celle akut lymfoblastisk leukæmi
Synonymer
  • 6-T CEM

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Affjedring
Biosikkerhedsniveau
2

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
6T-CEM (Cytion-katalognummer 305132)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6869

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
Alpha MEM, m: 2,0 mM stabil glutamin, uden: Ribonukleosider, w/o: Deoxyribonukleosider, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2g/L NaHCO3
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Oddyrkning
Homogeniser forsigtigt cellesuspensionen i kolben ved at pipettere op og ned, og tag derefter en repræsentativ prøve for at bestemme celletætheden pr. ml. Fortynd suspensionen til en cellekoncentration på 1 x 105 celler/ml med frisk dyrkningsmedium, og fordel den justerede suspension i nye kolber til videre dyrkning.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

07Donor

Donorens alder
4 år
Etnisk tilhørsforhold
Asiatisk