Przejdź do treści
6T-CEM
Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Ostra białaczka limfoblastyczna T-komórkowa
Synonimy
6-T CEM

Dokumenty

6T-CEM

Cell line · Numer produktu 305132

Linia komórkowa 6T-CEM jest zmutowaną odmianą ludzkiej linii komórek T CCRF-CEM pochodzącej z ostrej białaczki limfoblastycznej (ALL). Została ona uzyskana poprzez poddanie linii macierzystej...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa 6T-CEM jest zmutowaną pochodną ludzkiej linii komórek T ostrej białaczki limfoblastycznej (ALL) CCRF-CEM. Została ona opracowana poprzez wystawienie macierzystych komórek CEM na działanie 6-tioguaniny, co doprowadziło do selekcji podlinii wykazującej oporność na ten związek. Oporność ta jest wynikiem inaktywacji genu HPRT, który ma kluczowe znaczenie w szlaku ratowania puryn. Komórki 6T-CEM były szczególnie cenne w badaniu mechanizmów oporności na leki, zwłaszcza w odniesieniu do analogów puryn, takich jak 6-tioguanina. Dodatkowo, komórki te charakteryzują się wydzielaniem unikalnego czynnika indukującego supresję komórek T (SIF), który jest nie tylko niemitogenny i niecytotoksyczny, ale także zdolny do hamowania proliferacji komórek T przy jednoczesnym oszczędzaniu proliferacji komórek B w pewnych rozcieńczeniach.

komórki 6T-CEM i ich subklony, takie jak 6T-CEM-20, wykazały znaczny wzrost produkcji tego czynnika indukującego supresję, który ma potencjalne zastosowanie w badaniach immunologicznych, szczególnie w badaniach nad regulacją komórek T i supresją immunologiczną. Wykazano, że SIF wydzielany przez te komórki hamuje do 90% proliferacji limfocytów T indukowanej mitogenami w bardzo wysokich rozcieńczeniach (do 10^-9), co czyni te komórki silnym modelem do badania strategii terapeutycznych obejmujących modulację odpowiedzi immunologicznej. Wykorzystanie tych komórek w różnych konfiguracjach eksperymentalnych zapewniło wgląd w molekularne podstawy supresji immunologicznej, z potencjalnymi implikacjami dla rozwoju terapii chorób autoimmunologicznych oraz w kontekście transplantacji narządów w celu zapobiegania odrzuceniu przeszczepu.

Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Ostra białaczka limfoblastyczna T-komórkowa
Synonimy
  • 6-T CEM

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Limfoblast

04Identyfikatory

Źródło
6T-CEM (numer katalogowy Cytion 305132)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6869

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
Alpha MEM, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w/o: Rybonukleozydy, w/o: Deoksyrybonukleozydy, w: 1.0 mM Pirogronian sodu, w: 2.2g/L NaHCO3
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Hodowla komórek w subkulturze
Delikatnie homogenizować zawiesinę komórek w kolbie, pipetując w górę i w dół, a następnie pobrać reprezentatywną próbkę w celu określenia gęstości komórek na ml. Rozcieńczyć zawiesinę świeżym podłożem hodowlanym, aby uzyskać stężenie komórek wynoszące 1 x 105 komórek/ml, a następnie podzielić dostosowaną zawiesinę na porcje w nowych kolbach w celu dalszej hodowli.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Wiek dawcy
4 lata
Pochodzenie etniczne
Azjatycki