6T-CEM

La linea cellulare 6T-CEM è un derivato mutante della linea di cellule T della leucemia linfoblastica acuta umana (ALL) CCRF-CEM. È stata sviluppata esponendo le cellule CEM parentali alla 6-tioguanina, con la conseguente selezione di una sottoclasse che presenta resistenza a questo composto. Questa resistenza è il risultato dell'inattivazione del gene HPRT, critico nella via di salvataggio delle purine. Le cellule 6T-CEM si sono rivelate particolarmente preziose per lo studio dei meccanismi di resistenza ai farmaci, soprattutto per quanto riguarda gli analoghi delle purine come la 6-tioguanina. Inoltre, queste cellule sono caratterizzate dalla secrezione di un fattore induttore di soppressione delle cellule T (SIF) unico nel suo genere, che non solo non è mitogeno e non è citotossico, ma è anche in grado di sopprimere la proliferazione delle cellule T risparmiando quella delle cellule B a determinate diluizioni.

le cellule 6T-CEM e i loro sottocloni, come le 6T-CEM-20, hanno mostrato un aumento significativo della produzione di questo fattore induttore-soppressore, che ha potenziali applicazioni nella ricerca immunologica, in particolare nello studio della regolazione delle cellule T e della soppressione immunitaria. È stato dimostrato che il SIF secreto da queste cellule è in grado di sopprimere fino al 90% della proliferazione delle cellule T indotta da mitogeni a diluizioni estremamente elevate (fino a 10^-9), rendendo queste cellule un potente modello per l'esplorazione di strategie terapeutiche che prevedono la modulazione della risposta immunitaria. L'uso di queste cellule in vari setup sperimentali ha fornito approfondimenti sulle basi molecolari della soppressione immunitaria, con potenziali implicazioni per lo sviluppo di trattamenti per le malattie autoimmuni e nel contesto del trapianto di organi per prevenire il rigetto dell'innesto.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia